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ELISA檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答

時(shí)間:2018/1/16閱讀:2538
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以下是ELISA檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答整理分析出來(lái)以方便各位了解:

(1)問(wèn):小鼠乙酰膽堿Elisa檢測(cè)試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么作用?

答:可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時(shí)減去空白的值進(jìn)行計(jì)算,或者都不減,保持同一水平就行。

(2)問(wèn):那我們算出來(lái)的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值?

答:說(shuō)明個(gè)別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個(gè)點(diǎn)的時(shí)候,直線(xiàn)方程就有可能計(jì)算出負(fù)值。

(3)問(wèn):我兩個(gè)空白孔一個(gè)啥都不加,一個(gè)加了后面的A液,B液還有終止液, 請(qǐng)問(wèn)用哪一個(gè)?

答:用加了A液,B液還有終止液的那個(gè)更加準(zhǔn)確,因?yàn)闃颖径技舆^(guò)這些,可以排除相應(yīng)的干擾。

(4)問(wèn):我想問(wèn)一下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線(xiàn)性回歸?檢測(cè)出來(lái)的吸光度值很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右 ?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa檢測(cè)試劑盒)

答:是線(xiàn)性回歸。檢測(cè)出來(lái)的值比較低 ,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行 。

(5)問(wèn):做出來(lái)的結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線(xiàn)性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒(méi)有5-HT 表達(dá),這是什么原因?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa檢測(cè)試劑盒)

答:樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近,好像熒光法里面有種試劑盒可以檢測(cè)滴度。

(6)問(wèn):Elisa檢測(cè)試劑盒的使用的方法是什么啊?

答:采用雙抗夾心法 (目前暫行)

(7)問(wèn):一個(gè)孔需要多少量的血清?

答:一個(gè)孔上樣量10-50微升。

(8)問(wèn):未處理的樣本我需要郵寄多少的量?

答:每個(gè)孔需要100ul

(9)問(wèn):樣本怎么保存?

答:當(dāng)天要用的樣本保存4℃,隔天樣本-20℃(近期一個(gè)月左右要用的樣本),保存樣本-70℃(一年或者更長(zhǎng)時(shí)間多久都可以用),避免反復(fù)凍融。

(10)問(wèn):EP管是什么管?

答:離心管。

(11)問(wèn):收集血清的時(shí)候用什么管?

答:普通離心管即可。

(12)問(wèn):96t可以檢測(cè)多少個(gè)樣本?48t可以檢測(cè)多少個(gè)樣本?

答:96t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)85個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。96t單孔可以檢測(cè)90個(gè)樣,7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品控 1個(gè)空白對(duì)照。48t標(biāo)準(zhǔn)的可以檢測(cè)37個(gè)樣本,其他有10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。48t單孔可以檢測(cè)40個(gè)樣本,其他有7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔,1個(gè)空白對(duì)照。

(13)問(wèn):標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)85個(gè)樣本的和單孔相比, 有什么好的地方嗎?

答:標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)又叫復(fù)孔檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)重復(fù)性測(cè)的結(jié)果好,所以大家都叫復(fù)孔是標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)。

(14)問(wèn): 酶標(biāo)板分次使用 剩下的建議怎么保持 ?

答:要是真的用不完或標(biāo)本不多的情況下。做點(diǎn)處理后:板條和板架都是可拆卸的,可以再用之,前拆下4條放置錫箔袋或其他無(wú)污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。

(15)問(wèn):酶標(biāo)包被版是酶標(biāo)板嗎?

答:是的。

(16)問(wèn):請(qǐng)問(wèn)植物茉莉酸和水楊酸檢測(cè)的試劑盒,我們提取擬南芥的,一般取樣量是多少?

答:1-3g。

(17)問(wèn):大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA,大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5B),我發(fā)現(xiàn)試劑盒里缺少標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,沒(méi)有它我的實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行,盒子里面有特殊稀釋液是用來(lái)稀釋樣品的,但都沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,我的樣品已超出zui低檢測(cè)限,所以需要稀釋標(biāo)準(zhǔn)品才行嗎?

答:特殊稀釋液是用來(lái)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的,特殊稀釋液一般情況不用當(dāng)樣本濃度特別高是先用特殊稀釋液稀釋?zhuān)瑯?biāo)準(zhǔn)品需要再稀釋就也要用特殊稀釋液。

(18)問(wèn):測(cè)出來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)值前面幾盒都是0.98 才正常,后面怎么變成0.93了?

答:某個(gè)點(diǎn)偏離大可以去掉,保留5個(gè)點(diǎn)

(19)問(wèn):是不是空白對(duì)照就是什么都不加?

答:不加樣本,不加樣本稀釋液,不加酶標(biāo)試劑 其他都可以加。

(20)問(wèn):樣本稀釋液是配好的嗎?

答:樣本稀釋液是配好的

(21)問(wèn):樣本稀釋液可以用來(lái)直接稀釋血清嗎?

答:可以,直接加40ul就可以。

(22)問(wèn):檢測(cè)的時(shí)候需要在操凈臺(tái)中操作嗎,還是在外面操作就可以了?

答:要求不是很?chē)?yán)格,根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備而定,都可以。

(23)問(wèn):人和肽素(copeptin)Elisa,洗滌液是濃縮的,是一次配好,還是現(xiàn)配現(xiàn)用?

答:濃縮的,現(xiàn)配現(xiàn)用。

(24)問(wèn):Elisa方法的不測(cè)人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎?

答:Elisa不測(cè)滴度的,熒光法可以測(cè)。

(25)問(wèn):酶標(biāo)板不平,影響結(jié)果嗎?

答:不影響結(jié)果的。

(26)問(wèn):小鼠TNF-α ELISA 我的標(biāo)本是細(xì)胞,我想要測(cè)的結(jié)果:抑制TNF的產(chǎn)生 空白組、模型組、藥物組,藥物組要成梯度抑制TNF的產(chǎn)生、請(qǐng)問(wèn)Elisa方法的可以測(cè)嗎?

答:細(xì)胞可以測(cè) 但要分組,得到相應(yīng)的梯度值,計(jì)算結(jié)果。自己需要多查閱文獻(xiàn) 。

(27)問(wèn):人睪酮(T)Elisa,人雌三醇(E3)Elisa,是用什么酶標(biāo)記的?

答:辣根酶標(biāo)記的 標(biāo)本里不能加*

(28)問(wèn):我測(cè)植物水楊酸,標(biāo)本是煙草葉片怎么處理的?那上清液檢測(cè)SA時(shí),還需要用甲醇抽提嗎?

答:稱(chēng)取煙葉500mg,研磨成粉末狀,加入5ml濃度為0.01mol,PH值為7.4的PBS溶液,充分勻漿,離心取上清液(3000-4000轉(zhuǎn),15分鐘左右),分裝保存,一般需要保存需放在-80度,或者液氮中,備用,不用加甲醇。

(29)問(wèn):沒(méi)有做出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)來(lái),你知道什么原因嗎?

答:操作肯定有問(wèn)題,做之前把標(biāo)準(zhǔn)品搖勻下。

(30)問(wèn):買(mǎi)同一個(gè)指標(biāo)的幾個(gè)盒子,用不用都做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)?

答:如果同一個(gè)指標(biāo)買(mǎi)了3盒,建議每盒都做個(gè)標(biāo)曲。同一個(gè)盒子 ,即使分幾次用,做一個(gè)標(biāo)曲也行了,因?yàn)閿?shù)值不會(huì)偏差太大,差不多。

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