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用戶自備 1.5 毫升離心管:用于樣品操作的容器 微型臺式離心機:用于樣品染色操作的容器 血細胞計數(shù)器:用于細胞計數(shù) 載玻片和蓋玻片:用于細胞爬片 (共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的細胞
實驗步驟2 1. 移取新鮮獲得的 1 毫升(48 小時內(nèi))到 1.5 毫升離心管 2. 放進 37℃培養(yǎng)箱孵育 30 分鐘 3. 放進微型臺式離心機離心 5 分鐘,速度為 600g 4. 小心抽去上清液 5. 加入 xx 毫升保存液(Reagent A),混勻顆粒群 6. 在血細胞計數(shù)器上進行細胞計數(shù),并調(diào)整到 2 X 107 細胞/毫升 7. 移取 100 微升細胞到新的 1.5 毫升離心管 8. 加入 xx 微升染色液 A(Reagent B),混勻 9. 37℃溫度下孵育 10 分鐘,避免光照 10.小心加入 xx 微升染色液 B(Reagent E),混勻 11.37℃溫度下孵育 10 分鐘,避免光照 12.移取 50 微升到載玻片上 13.小心抽去染色液 14.蓋上蓋玻片 15.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)(注意:每個視野計數(shù) 200 個) 觀察綠色熒光—染色液 B(Reagent E):濾波器激發(fā)波長 490nm,散發(fā)波長 520nm 觀察紅色熒光—染色液 A(Reagent B):濾波器激發(fā)波長:488nm;散發(fā)波長:630nm 16.分析結(jié)果 分類
染色結(jié)果 意義 I 整個頭部呈現(xiàn)明亮綠色熒光 質(zhì)膜完整(intact) II 整個或部分頭部呈現(xiàn)紅色熒光 質(zhì)膜*損傷(damaged) III 整個頭部呈現(xiàn)橘黃色熒光 質(zhì)膜損傷
注意事項 1. 本產(chǎn)品為 20 次操作 2. 操作時須戴手套 3. 樣品檢測前,建議在血細胞計數(shù)器上進行細胞計數(shù) 4. 細胞計數(shù)時乘上稀釋倍數(shù) 104。標準血細胞計數(shù)器(Hemocytometer)的計算方法是: 1 毫米方塊的細胞計數(shù) X 104(稀釋倍數(shù))=實際細胞數(shù)/毫升 5. 染色完成后,即刻進行檢測分析 6. 本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標準 1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定 2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
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