亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海宸功生物技術(shù)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

18918128223

當(dāng)前位置:首頁(yè)   >>   資料下載   >>   乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2018-5-9閱讀:1943
分享:
  • 提供商

    上海宸功生物技術(shù)有限公司
  • 資料大小

    148.9KB
  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    265次
  • 資料類(lèi)型

    PDF 文件
  • 瀏覽次數(shù)

    1943次
點(diǎn)擊免費(fèi)下載該資料

乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

 

主要用途

 

乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測(cè)由于細(xì)胞損傷導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細(xì)胞外,使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑INT)還原為紅色甲臜(farmazan,即比色法定量測(cè)定酶活性,以評(píng)價(jià)活體細(xì)胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種藥物、化學(xué)、環(huán)境因子和營(yíng)養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長(zhǎng)中的動(dòng)物或人體細(xì)胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測(cè)的更佳選擇。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,簡(jiǎn)捷敏感,性能穩(wěn)定,顯色清晰,檢測(cè)準(zhǔn)確,重復(fù)性好。

 

技術(shù)背景

 

細(xì)胞凋亡或壞死而造成的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的損害或*裂解導(dǎo)致細(xì)胞漿內(nèi)的酶釋放外泄到培養(yǎng)液里,其中包括活性穩(wěn)定的乳酸脫氫酶。乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase;LDH)釋放法的測(cè)定是基于在乳酸脫氫酶的作用下,還原NAD+反應(yīng)生成的NADH,再與氧化型2-(4-碘苯)-3-(4-硝基苯)-5-苯四唑(IodonitrotetrazoliumINT在硫辛酰胺脫氫酶(diaphorase)的催化下反應(yīng)生成紅色生色產(chǎn)物甲formazan),在490nm波長(zhǎng)下產(chǎn)生吸收峰,從而確定釋放的乳酸脫氫酶的活性,作為細(xì)胞膜完整性的標(biāo)志:吸光值與細(xì)胞死亡或毒性程度成線性正相關(guān)。酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)為:

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

裂解液(Reagent A)      毫升

補(bǔ)充液(Reagent B) 毫升

反應(yīng)液(Reagent C)      毫升

顯色液(Reagent D)      毫升

終止液(Reagent E)      毫升

標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent F)     微升(另購(gòu))

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                         1份

 

保存方式

 

保存在-20℃冰箱里,反應(yīng)液(Reagent C)和顯色液(Reagent D)避免光照有效保證6月

 

 

用戶自備

 

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板:用于細(xì)胞操作的容器

細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)

孔板離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞

酶標(biāo)儀:用于定量檢測(cè)染色后的細(xì)胞

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

  • 貼壁細(xì)胞檢測(cè)

 

  • 準(zhǔn)備96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的待測(cè)細(xì)胞(每孔100微升):包括未處理的對(duì)照細(xì)胞(樣品對(duì)照孔),未處理的后續(xù)裂解的細(xì)胞(樣品zui大酶活性對(duì)照孔),以及藥物處理的細(xì)胞(處理樣品孔),并做好標(biāo)記(細(xì)胞密度為每孔2 X 103至2 X 104細(xì)胞)
  • 到規(guī)定的檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)前1小時(shí),從濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里取出待測(cè)的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(注意:確保細(xì)胞培養(yǎng)液維持在100微升容量
  • 加入xx微升裂解液(Reagent A)到未處理的后續(xù)裂解的細(xì)胞孔里(樣品zui大酶活性對(duì)照孔
  • 同時(shí)加入xx微升補(bǔ)充液(Reagent B)到其余所有檢測(cè)孔里
  • 放回濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里,繼續(xù)培養(yǎng)1小時(shí),即規(guī)定檢測(cè)時(shí)間
  • 從濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里取出待測(cè)的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板
  • 放進(jìn)孔板離心機(jī)離心10分鐘,速度為250g
  • 分別小心移取50微升上清液到新的96孔板的相應(yīng)孔里,避免觸摸細(xì)胞顆粒,同時(shí)注意做好標(biāo)記
  • 分別加入xx微升反應(yīng)液(Reagent C)(注意:使用前,須混勻)
  • 分別加入xx微升顯色液(Reagent D) 
  • 搖動(dòng)96孔板混勻
  • 在室溫下孵育30分鐘,避免光照
  • (選擇步驟)分別加入xx微升終止液(Reagent E)
  • 即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀里測(cè)讀:波長(zhǎng)490nm
  • 計(jì)算處理樣品實(shí)際吸光讀數(shù):處理樣品孔吸光讀數(shù)-樣品對(duì)照孔吸光讀數(shù)
  • 計(jì)算樣品細(xì)胞zui大酶活性的實(shí)際吸光讀數(shù):樣品zui大酶活性對(duì)照孔吸光讀數(shù)-樣品對(duì)照孔吸光讀數(shù)
  • 計(jì)算細(xì)胞毒性或死亡率(%):

 

(處理樣品實(shí)際吸光讀數(shù)÷樣品細(xì)胞zui大酶活性的實(shí)際吸光讀數(shù))X 100

 

  • 或繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為實(shí)際吸光讀數(shù)(A);橫坐標(biāo)(X軸)為細(xì)胞數(shù)或時(shí)間點(diǎn)或藥物濃度;據(jù)此計(jì)算其LD50

 

  • 懸浮細(xì)胞檢測(cè)

 

  • 準(zhǔn)備96孔細(xì)胞培養(yǎng)板的待測(cè)懸浮細(xì)胞(每孔100微升):包括未處理的對(duì)照細(xì)胞(樣品對(duì)照孔),未處理的后續(xù)裂解的細(xì)胞(樣品zui大酶活性對(duì)照孔),以及藥物處理的細(xì)胞(處理樣品孔),并做好標(biāo)記(細(xì)胞密度為每孔5 X 103至5 X 104細(xì)胞)
  • 到規(guī)定的檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)前1小時(shí),從濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里取出待測(cè)的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(注意:確保細(xì)胞培養(yǎng)液維持在100微升容量
  • 加入xx微升裂解液(Reagent A)到未處理的后續(xù)裂解的細(xì)胞孔里(樣品zui大酶活性對(duì)照孔
  • 同時(shí)加入xx微升補(bǔ)充液(Reagent B)到其余所有檢測(cè)孔里
  • 放回濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里,繼續(xù)培養(yǎng)1小時(shí),即規(guī)定檢測(cè)時(shí)間
  • 從濕潤(rùn)的細(xì)胞培養(yǎng)箱里取出待測(cè)的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板
  • 放進(jìn)孔板離心機(jī)離心10分鐘,速度為250g
  • 分別小心移取50微升上清液到新的96孔板的相應(yīng)孔里,避免觸摸細(xì)胞顆粒,同時(shí)注意做好標(biāo)記
  • 分別加入xx微升反應(yīng)液(Reagent C)(注意:使用前,須混勻)
  • 分別加入xx微升顯色液(Reagent D) 
  • 搖動(dòng)96孔板混勻
  • 在30℃溫度下孵育30分鐘,避免光照
  • (選擇步驟)分別加入xx微升終止液(Reagent E)
  • 即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀里測(cè)讀:波長(zhǎng)490nm
  • 計(jì)算處理樣品實(shí)際吸光讀數(shù):處理樣品孔吸光讀數(shù)-樣品對(duì)照孔吸光讀數(shù)
  • 計(jì)算樣品細(xì)胞zui大酶活性的實(shí)際吸光讀數(shù):樣品zui大酶活性對(duì)照孔吸光讀數(shù)-樣品對(duì)照孔吸光讀數(shù)
  • 計(jì)算細(xì)胞毒性或死亡率(%):

 

(處理樣品實(shí)際吸光讀數(shù)÷樣品細(xì)胞zui大酶活性的實(shí)際吸光讀數(shù))X 100

 

  • 或繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為實(shí)際吸光讀數(shù)(A);橫坐標(biāo)(X軸)為細(xì)胞數(shù)或時(shí)間點(diǎn)或藥物濃度;據(jù)此計(jì)算其LD50

 

注意事項(xiàng)

 

  • 本產(chǎn)品為100次(1個(gè)96孔板)操作
  • 操作時(shí)須戴手套
  • 整個(gè)操作須無(wú)菌操作
  • 建議每個(gè)樣品安排3個(gè)孔,即重復(fù)3次,計(jì)算時(shí)取其平均值
  • 檢測(cè)體系相應(yīng)增加,試劑用量按比例相應(yīng)增加:例如200微升檢測(cè)體系,試劑用量增加1倍
  • 每孔中的培養(yǎng)液需100微升,避免使用周邊培養(yǎng)孔(常常液體蒸發(fā)而減少)
  • 系統(tǒng)測(cè)試,可以加入10微升標(biāo)準(zhǔn)液(Reagent G)到50微升無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液里,然后加入反應(yīng)液和顯色液即可
  • 細(xì)胞裂解效果不佳,可以使用20微升裂解液(Reagent A)處理
  • 孵育時(shí),須避光
  • 染色完成后,建議即刻檢測(cè),zui遲不得超過(guò)1小時(shí)
  • 細(xì)胞培養(yǎng)和處理時(shí),避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和EDTA,否則影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性
  • 血清含有乳酸脫氫酶,建議使用濃度不要超過(guò)1%
  • 細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)、密度過(guò)高、離心速度過(guò)大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過(guò)大等因素會(huì)造成細(xì)胞自然釋放乳酸脫氫酶
  • 酚紅會(huì)干擾檢測(cè)
  • 樣品zui大酶活性對(duì)照孔或zui大OD吸光讀數(shù)與細(xì)胞裂解程度密切相關(guān)
  • 如果用戶沒(méi)有孔板離心機(jī),則移取上清液時(shí)格外小心
  • 如果用戶沒(méi)有匹配的波長(zhǎng),可以使用波長(zhǎng)470nm至570nm之間的任一波長(zhǎng)替代
  • 本公司提供系列細(xì)胞繁殖檢測(cè)試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

 

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
久久久中文字幕在线视频| 久久久一区二区三区日本| 白虎鲍鱼抠逼免费看| 欧美日韩国产这里只有精品| 亚洲综合极品香蕉久久网| 大鸡巴插我在线观看| 操女人大逼视频下载| 国产蜜月精品高清一区二区三区| 强奸啪啪啪好大欧美| 美女大鸡操很多水在线看| 日韩 欧美 一区 二区三区| 看女生b免费视频| 精品精品国产一区二区性色av| 最新免费高清无码片| 精品一区二区久久久久无码| 青娱乐极品视觉导航| 在线视频观看一区| 欧美日韩亚洲人人夜夜澡| 男生插女生下面流出白色精液视频| 色999日韩自偷自拍美女| 最新的精品亚洲一区二区| 99久久久国产精品美女| 欧美国产日韩a欧美在线| 一级特黄大片色欧美精品| 99爱这里只有精品| 无码av一区二区大桥久未| 色婷婷五月综合久久| 老头鸡巴操老太骚逼| av日韩在线观看一区二区三区| 女人被男人躁爽色欲国产| 国产 欧美 日韩 黄片| 99久久99久久精品视频| 我要操日本女人的逼| 瓯美在线免费视频笫一区第二区| 那种视频在线观看你懂的| 久久精品国产亚洲高清| 淫荡淫水逼操烂视频| 中文字幕乱码一区二区三区麻豆| 怎么样操女人的逼亚洲Av黄片段| 91在线一区二区| 内射后入在线观看一区|