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大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2020-05-12 16:52:05瀏覽次數(shù):191次

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大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒●品牌:子科生物ZIKER,美國(guó)R&D,美國(guó)immonoway,美國(guó)sciencell,德國(guó)IBL
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大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。 
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶(hù)實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。 
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。

有兩種設(shè)定空白對(duì)照的方案: 
(1)將 TMB 空白顯色孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸 光 值 后 , 在 坐 標(biāo) 紙 上 畫(huà) 出 曲 線(xiàn) , 以 吸 光 值 作 為 縱 坐 標(biāo) , 以 濃 度 作 為 橫 坐 標(biāo) 。 
(2)將零孔設(shè)為對(duì)照。所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,得到的數(shù)據(jù)可以 直接在坐標(biāo)紙上畫(huà)出曲線(xiàn)。 

樣品稀釋的一般原則 
用戶(hù)須估計(jì)樣品待測(cè)因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測(cè)因子的濃度 處于 ELISA 試劑盒的檢測(cè)范圍。根據(jù)待測(cè)因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的稀釋方案:
高:指待測(cè)因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297μ ι 樣品稀釋液加 3μ ι 樣品。 
中:指待測(cè)因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225μ ι 樣品稀釋液加 25μ ι 樣品。 
低:指待測(cè)因子在 31.2→2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100μ ι 樣品稀釋液加 100μ ι 樣品。 
特低:指待測(cè)因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋?zhuān)疵靠?100μ ι 樣品直接加入。

以上方案僅供參考,樣品的稀釋?xiě)?yīng)有詳細(xì)記錄。

ZIKER-1311R    anti-LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1)  淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體
ZIKER-0101R    Anti-M2-PK ( pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激酶-M2抗體
ZIKER-0101M    Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激酶-M2(小鼠來(lái)源抗體)
ZIKER-1014R    Anti-Integrin αM/CD11b (Mac-1/CR3A)(Integrin-alpha2)  巨噬細(xì)胞表面分子/整合素-α2抗體
ZIKER-1150R    Anti-ChRM1 (muscarinic acetylcholine receptor)  毒蕈堿型乙酰膽堿受體M1抗體
ZIKER-0642R    Anti-MADCAM-1(-Mucosal addressin cellular adhesion molecule-1)  粘膜選址素抗體
ZIKER-0257R    Anti-MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;)  髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體
ZIKER-0258R    Anti-MAG-a/L-MAG (Myelin associated glycoprotein)  髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體
ZIKER-0817R    Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein (melanoma antigen family A member 1)  黑素瘤抗原-1抗體
ZIKER-1041R    Anti-MAPKK1 (MAP kinase kinase 1)  絲裂原活化蛋白激酶激酶1
ZIKER-0223R    Anti-MAPKK2 (MAP kinase kinase 2)  絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體
ZIKER-0792R    Anti-Maspin (mammary serine protease inhibitor)  抑癌基因抗體
ZIKER-0531R    Anti-Matriptase  蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體
ZIKER-0380R    Anti-MBP (Myelin ZIKERsic Protein, MBP)  髓鞘堿性蛋白抗體
ZIKER-1101R    Anti-MCP-1 (monocyte chemotactic protein1)  巨噬細(xì)胞趨化蛋白-1抗體
ZIKER-1042R    Anti-M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors)  巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體
ZIKER-1043R    Anti-MDM2 (urine double minute 2)  雙微體2癌基因抗體
ZIKER-0815R    Anti-Megsin/SER—PINB7  絲氨酸(或半胱氨酸)蛋白酶抑制劑B7抗體
ZIKER-0051R    Anti-Melan-A/MART-1  黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體
ZIKER-0401R    Anti-Metal ion transporter  擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
ZIKER-0557R    Anti-Mfn1 (Mitofusin1)  線(xiàn)粒體融合蛋白1抗體
ZIKER-1002R    Anti-MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase)  O6甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
ZIKER-1328R    anti-MT(metallothionein)  金屬基質(zhì)硫蛋白抗體
ZIKER-0900R    anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(NT)  層粘連蛋白受體1抗體(N端)
ZIKER-0901R    anti-MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT)  層粘連蛋白受體1抗體(C端)

 

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