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ELISA試劑盒檢測(cè)方法:雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、間接法測(cè)抗體、雙位點(diǎn)一步法、 競(jìng)爭(zhēng)法 、捕獲法、ABS-ELISA方法,我們子科生物主要采用雙抗體夾心法。詳細(xì)可以咨詢我們銷售人員。
的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過(guò)酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過(guò)顏色的形式顯現(xiàn)出來(lái)。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無(wú)選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無(wú)關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過(guò)共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候,被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測(cè)人員可以裸眼觀察,可以通過(guò)顏色來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過(guò)顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)讀取吸光度值。
●注意:1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。
●洗板方法:
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
相關(guān)產(chǎn)品如下:CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated Antigen-4) 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4/細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗體 0.1ml 子科ZIKER
Phospho-MEK6 (Ser207) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體 0.1ml 子科ZIKER
Horse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記馬IgM 0.3ml 子科ZIKER
human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記人IgG 0.3ml 子科ZIKER
human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記人IgM 0.3ml 子科ZIKER
CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated Antigen-4) 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4/細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-5抗體 0.2ml 子科ZIKER
CT-R(Calcitonin receptor) 降鈣素受體抗體 0.2ml 子科ZIKER
CULLIN/Cdc53/CUL/SCFCdc4 CULLIN抗體 0.2ml 子科ZIKER
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Cx32(Connexin-32) 間隙連接蛋白32抗體 0.1ml 子科ZIKER
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Cx43 (Connexin-43) 間隙連接蛋白43抗體 0.1ml 子科ZIKER
Cx43 (Connexin-43) 間隙連接蛋白43抗體 0.2ml 子科ZIKER
CX45 (Connexin-45) 間隙連接蛋白45抗體 0.1ml 子科ZIKER
CX45 (Connexin-45) 間隙連接蛋白45抗體 0.2ml 子科ZIKER
CXCR1/IL-8RA (CXC-chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 0.1ml 子科ZIKER
CXCR1/IL-8RA (CXC-chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 0.2ml 子科ZIKER
CXC-R2/CD182(CXC-chemokine receptor 2) 細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml 子科ZIKER
CXC-R2/CD182(CXC-chemokine receptor 2) 細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 0.2ml 子科ZIKER
Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 磷酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體 0.1ml 子科ZIKER