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Pierce™ IgG 篩選用蛋白 G 離心板

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產(chǎn)品型號Thermo Scientific

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更新時間：2023-08-08 13:16:25瀏覽次數(shù)：176次

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產(chǎn)品簡介

Pierce™ IgG 篩選用蛋白 G 離心板

詳細(xì)介紹

Thermo Scientific™ Pierce™ IgG 篩選用蛋白 G 瓊脂糖離心板為快速純化和篩選抗體以及免疫沉淀 (IP) 提供了高通量形式。96孔離心板的每個孔可以處理 10–100 µL 的血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或腹水樣品。

Pierce 蛋白 G 瓊脂糖的特點：

?蛋白 G—固定化蛋白 G 適用于從小鼠、人、牛、山羊和綿羊血清中純化多克隆 IgG（包括人 IgG3 和小鼠 IgG1 同種型）
? 瓊脂糖樹脂—支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
? 惰性且穩(wěn)定—*的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價鍵固定蛋白 G，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標(biāo)準(zhǔn)容量— Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 G，提供 11–15 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量

Pierce 蛋白 G 瓊脂糖包含共價固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 G。該特殊種類的親和樹脂可提供通用的色譜特點組合，用于從哺乳動物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于許多親和純化系統(tǒng)。

蛋白 G 是源自 G 群鏈球菌的細(xì)菌細(xì)胞壁蛋白，現(xiàn)可在大腸桿菌中以重組形式生產(chǎn)。與蛋白A相同，蛋白G可與大多數(shù)哺乳動物的免疫球蛋白結(jié)合，結(jié)合部位主要為其Fc區(qū)。天然蛋白G包含兩個免疫球蛋白結(jié)合位點以及白蛋白和細(xì)胞表面結(jié)合位點。重組形式的蛋白G中已除去這些白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點，以減少免疫球蛋白純化過程中的非特異性結(jié)合。重組蛋白G分子量約為21.6kDa，但在SDS-PAGE中表觀大小為31至34kDa。IgG 結(jié)合功能在 pH 值為 5 時較佳，但在近中性條件（pH 值 7.0 至 7.2）下也可高效結(jié)合。

與蛋白 A 相比，蛋白 G 可與人、小鼠和大鼠血清中更廣泛的 IgG 亞類結(jié)合。其中，除了與蛋白A一樣能夠結(jié)合其他類型免疫球蛋白之外，蛋白G還對人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三種IgG亞型具有特別強的結(jié)合能力。因此，在涉及這些物種和抗體亞型的應(yīng)用中一般建議采用蛋白G。關(guān)于其他物種，蛋白 G 對牛、山羊和綿羊 IgG 的結(jié)合能力更強，但對豬、豚鼠、犬和貓 IgG 的結(jié)合能力弱于蛋白 A。

Pierce 蛋白 G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 G。

Pierce 蛋白 G 瓊脂糖可從許多哺乳動物物種的血清和其他液體中有效地親和純化 IgG。除了來自人、山羊和綿羊樣品的大多數(shù) IgG 同種型外，蛋白 G 還特別適用于與小鼠抗體（包括 IgG1）配合使用。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
?支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長期）
? 平均粒徑：45 至 165 微米
? 排阻極限：10,000至4,000,000 道爾頓
?體積流速：約1 mL/分鐘（對于1 cm 直徑柱）
?線性速度：30 cm/h
? 壓力：低于 25psi (1.5 bar)；定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降（注：液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統(tǒng)壓力，而不是跨色譜柱壓降。）

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? 使用抗體結(jié)合蛋白進(jìn)行抗體純化

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

關(guān)鍵詞：色譜柱