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當(dāng)前位置：江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>江蘇菲亞為您推薦確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟
1. | 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。 |
2. | 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。 |
3. | 每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo)，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。 |
4. | 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2～3代。 |
5. | 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。 |
6. | 重復(fù)步驟4。 |
7. | 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。 |
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