1979年神經(jīng)細胞培養(yǎng)出現(xiàn)了一個重要進展，用化學添加劑即可維持神經(jīng)細胞存活與生長而不需要在培養(yǎng)基中添加血清。其工作基礎是用合適的激素、營養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，zui后找到了適合大多數(shù)細胞培養(yǎng)的試劑配方，該配方稱為N2，專門用于神經(jīng)細胞培養(yǎng)，zui早是用在B104大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系的培養(yǎng)。它的基礎培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉鐵蛋白、黃ti酮、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對于大多數(shù)類型細胞的存活和生長有重要作用，硒是*產(chǎn)生的合作因子，可能有助于過氧化物和超氧化物的水解，有報道說還能防止細胞的光照損傷。隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉鐵蛋白。

    血清中含有的組分，例如血清蛋白，可作為代謝毒物清除劑使用并能聚集于培養(yǎng)基中。當缺乏這些成分時，如神經(jīng)元在無血清培養(yǎng)基中生長時，特別容易為過氧化物及自由基傷害，這已被許多研究者注意到了。過氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培養(yǎng)基中過氧化物和超氧化物的累積，有報道講可以促進低密度培養(yǎng)細胞的存活。有學者發(fā)現(xiàn)細胞存活可為氧分壓的下降而促進。因而，無血清培養(yǎng)基的配方常含有抗氧化劑的試劑。例如，維生素E和丙酮酸，可作為過氧化物清除劑使用。上述這些影響在高密度培養(yǎng)時變小，特別是神經(jīng)元與膠質(zhì)共培養(yǎng)時，它們可以吸收和代謝神經(jīng)元毒性物質(zhì)如*。

    應該注意，盡管無血清培養(yǎng)基是有化學限定性的，但在培養(yǎng)過程中它仍有變動，培養(yǎng)起始時可能有些物質(zhì)缺乏，而后細胞的產(chǎn)物可能積累，從而使培養(yǎng)基的成分改變。這其實是有另一方面的好處，即條件培養(yǎng)基（已培養(yǎng)過細胞的培養(yǎng)基）的形成，條件培養(yǎng)基常常用來增加神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞的發(fā)育。