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江蘇菲亞生物科技有限公司

ELISA質(zhì)量控制--室內(nèi)質(zhì)量控制程序

時(shí)間:2017-8-8閱讀:249
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一、zui適宜條件下的測定誤差

    zui適宜條件下已知值質(zhì)控血清變異(optimal conditions variance,簡稱OCV)的測定:在本實(shí)驗(yàn)室zui適宜條件下(包括操作者、試劑、儀器等)檢測質(zhì)控血清20-30次,測得結(jié)果計(jì)算,求出該組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示該實(shí)驗(yàn)室的工作質(zhì)量。

    現(xiàn)舉例說明HBsAg ELISA法檢測時(shí)OCV的測定。使用的質(zhì)控制血清為臨界血清,HBsAg濃度為5ng/ml。在該實(shí)驗(yàn)室中選擇素質(zhì)、操作zui熟練的技術(shù)員進(jìn)行認(rèn)真地專門測定,選用的試劑盒,檢測之前,將恒箱、加樣器等認(rèn)真校正、調(diào)校正、調(diào)試,使用新的加樣吸頭等,即在zui適宜、的條件下進(jìn)行檢測。除質(zhì)控血清外同時(shí)測定陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品。并作雙份測定,得出2個(gè)吸光值(A值),求出X。連續(xù)作20次,求出20個(gè)X,即X1……X20。從這20個(gè)數(shù)據(jù)中,求出OCV的X和SD。

二、已知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差

    常規(guī)條件下已知值質(zhì)控血清變異(routine conditions variance-known value,簡稱RCVK)的測定:做常規(guī)檢驗(yàn)的技術(shù)人員,在常規(guī)檢驗(yàn)的條件下,將質(zhì)控血清放在常規(guī)檢測樣本中,進(jìn)行20次檢驗(yàn),結(jié)果計(jì)算同OCV法。一般認(rèn)為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內(nèi)可以接受。若太大應(yīng)該查找原因,使其向OCV的SD值靠近。在改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室條件后(例如較正加樣器,糾正洗板操作,調(diào)正溫育溫度等),重新進(jìn)行RCVK的測定。如果RCVK的SD值更小,說明OCV不是zui適宜條件下測定的,應(yīng)重新再測OCV。常規(guī)條件下,RCVK肯定要比OCV大。通過質(zhì)控控制各項(xiàng)條件,使RCVK的數(shù)據(jù)盡可能接近OCV值。RCVK的數(shù)據(jù)反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作的質(zhì)量,用于作質(zhì)控圖,對(duì)室內(nèi)檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行控制,每日檢驗(yàn)的結(jié)果,報(bào)告能否發(fā)出。

三、未知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差

    常規(guī)條件下,未知值質(zhì)控血清變異(routine conditions variancl-unknown value 簡稱RCVU)的測定:有時(shí)為了避免主觀性,再作RCVU測定。測定步驟同RCVK,但檢測的操作者不知質(zhì)控血清的定值,或在操作者不知哪份是質(zhì)控血汪清的條件下進(jìn)行常規(guī)檢驗(yàn),以排除操作者的主觀性。在此不再舉例說明。

 

 

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