細(xì)胞：KB細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人口腔上皮癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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在生物體系中進(jìn)行的生物相容的成鍵與斷鍵反應(yīng)有助于在分子水平研究生物體系。
近年來(lái)可見(jiàn)光催化領(lǐng)域的研究發(fā)現(xiàn)可見(jiàn)光引發(fā)的自由基反應(yīng)具有優(yōu)秀的化學(xué)選擇性可在溫和條件下與生物大分子相容,從而提供了發(fā)展生物相容反應(yīng)的新思路。
可見(jiàn)光引發(fā)的基于環(huán)狀高價(jià)的脫硼炔基化，烯基化和脫羧炔酮化反應(yīng)以及基于酞酰亞胺的脫羧炔基化和烯丙基化反應(yīng)與生物大分子相容，并且不影響蛋白酶的生物活性。
惰性鍵的選擇性官能化可用于復(fù)雜分子的后期修飾以及化學(xué)生物學(xué)研究；
然而該類(lèi)反應(yīng)在溫和條件下尤其是生物相容條件下十分困難，可見(jiàn)光引發(fā)的自由基反應(yīng)提供了解決此問(wèn)題的新思路。
烷氧自由基是化學(xué)與生物學(xué)研究中重要的活性中間體，可用于機(jī)理研究及化學(xué)轉(zhuǎn)化過(guò)程。
傳統(tǒng)產(chǎn)生烷氧自由基的條件為加熱、AIBN/Bu3SnH、紫外光照射或強(qiáng)氧化劑等，雖然在有機(jī)合成中得到廣泛應(yīng)用這些較為劇烈的反應(yīng)條件對(duì)許多敏感的化學(xué)官能團(tuán)不兼容，進(jìn)而限制了烷氧自由基的應(yīng)用。
