細(xì)胞:HLE-B3細(xì)胞
中文名稱(chēng):人晶狀體上皮細(xì)胞系
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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胚胎干細(xì)胞地位不可取代
把心臟病存活者自己的骨髓干細(xì)胞輸注到他們受損的心臟中,起到的作用微乎其微。
盡管研究都表明,接受自身骨髓干細(xì)胞的病人心臟功能都得到了一點(diǎn)點(diǎn)改善,但是病人的主觀感覺(jué)并非明顯,而且他們的生存期也不比沒(méi)有進(jìn)行骨髓干細(xì)胞治療的病人要長(zhǎng)。
但是,為什么前一項(xiàng)研究中注入干細(xì)胞和未注入干細(xì)胞的病人幾乎沒(méi)有差異,而后兩項(xiàng)研究中注入干細(xì)胞的病人卻有輕微的心臟功能改善呢?
雖然還不能給出明確答案,但可能的解釋是,注入的干細(xì)胞數(shù)量有差異,或者說(shuō)有多少干細(xì)胞在心臟扎根并分化成新的心肌細(xì)胞,起到泵血的作用。
在此情況下,是否利用骨髓干細(xì)胞對(duì)心臟病或神經(jīng)性疾病進(jìn)行干細(xì)胞治療已讓研究人員進(jìn)退維谷。但是,由于還有一點(diǎn)點(diǎn)功效,目前還有10多個(gè)公司在進(jìn)行骨髓和臍帶血干細(xì)胞的治療研究。所以,問(wèn)題就自然回到了胚胎干細(xì)胞上。
因?yàn)檫^(guò)去15年中,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,胚胎干細(xì)胞不僅能分化成神經(jīng)細(xì)胞,而且能生長(zhǎng)成搏動(dòng)的心肌細(xì)胞,當(dāng)然這種情況還沒(méi)有在人身上試驗(yàn)成功過(guò),但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)推論在人身上是完_全可能的。所以,要使再生醫(yī)學(xué)獲得發(fā)展,治療各種重癥病人,就非得依靠胚胎干細(xì)胞不可了。
然而,在一些國(guó)家是禁止胚胎干細(xì)胞研究和治療的,而另一些國(guó)家則可以進(jìn)行胚胎干細(xì)胞研究,但得嚴(yán)格限制在14天內(nèi)的胚胎,如我國(guó)。上述三項(xiàng)研究的結(jié)果也許是另一種動(dòng)力,只要遵守嚴(yán)格的法律和倫理規(guī)范,應(yīng)當(dāng)解禁對(duì)胚胎干細(xì)胞的研究和治療使用,因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞比成年干細(xì)胞更優(yōu)秀。