293 Ad5細(xì)胞培養(yǎng)、說(shuō)明書(shū)

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NG108-15細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法：見(jiàn)說(shuō)明書(shū)    

293 Ad5細(xì)胞培養(yǎng)、說(shuō)明書(shū) 技術(shù)文章：

MicroRNAs是一種大小約21—23個(gè)堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過(guò)Dicer酶加工后生成，不同于sirna（雙鏈）但是和siRNA密切相關(guān)。

這些非編碼小分子RNA（miRNAs）參與調(diào)控基因表達(dá)，但其機(jī)制區(qū)別于siRNA介導(dǎo)的mRNA降解。*個(gè)被確認(rèn)的miRNA是在線蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)的lin-4 和let-7，隨后多個(gè)研究小組在包括人類(lèi)、果蠅、植物等多種生物物種中鑒別出數(shù)百個(gè)miRNAs。

MicroRNA對(duì)于植物的胚芽發(fā)育有重要的影響，這種影響主要是通過(guò)減少調(diào)節(jié)基因表達(dá)的蛋白的表達(dá)，而在脊椎動(dòng)物中，microRNA的這一作用并不明顯。

但是研究小組發(fā)現(xiàn)的驚人結(jié)果揭示了在小鼠胚胎中miRNAs對(duì)心臟發(fā)育的意義。這一研究說(shuō)明了miRNAs在心臟基因調(diào)控上、下游中的作用，也為理解器官在形成時(shí)的調(diào)控奠定了良好的基礎(chǔ)。

研究小組選定了兩個(gè)miRNA相關(guān)基因：miR-1-1 and miR-1-2，這兩個(gè)基因產(chǎn)物在心臟和肌肉組織中大量表達(dá)。

由于在胚胎結(jié)構(gòu)中定位miRNAs十分困難，所以研究人員利用了一個(gè)可以產(chǎn)生藍(lán)點(diǎn)的報(bào)告基因來(lái)便于定位miRNAs。

他們將報(bào)告基因接到miR-1-1的前端，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在胚胎期小鼠的心臟和肌肉中都發(fā)現(xiàn)有報(bào)告基因的表達(dá)，并且這種表達(dá)受到幾個(gè)心臟和肌肉關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子（serum response factor (SRF), Mef2 和 MyoD）的調(diào)控。

這個(gè)結(jié)果表明miRNAs就像其它一般的基因一樣的受到調(diào)控，因此可能miRNAs也會(huì)對(duì)和其它基因一樣的“發(fā)育暗示”做出反應(yīng)。

研究者的這一發(fā)現(xiàn)開(kāi)啟了器官形成過(guò)程中調(diào)控的一個(gè)全新的研究視角，即通過(guò)miRNA調(diào)控器官發(fā)育形成。但是許多問(wèn)題還未知，需要進(jìn)一步進(jìn)行研究。   

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