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Anti-FUT5抗體,FUT5抗體

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更新時(shí)間：2017-11-03 14:28:51瀏覽次數(shù)：147次

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上海研盟生物科技有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：9950條

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產(chǎn)品簡介

“Anti-FUT5抗體,FUT5抗體"抗體規(guī)格0.1ml、0.2ml、1ml，抗體產(chǎn)品有效期一年，質(zhì)保三個(gè)月，質(zhì)保期內(nèi)出現(xiàn)任何質(zhì)量問題或是出不了實(shí)驗(yàn)結(jié)果均可免費(fèi)退換：

詳細(xì)介紹

上海研盟生物科技有限公司Anti-FUT5抗體,FUT5抗體*，主要應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)中。說明書隨貨發(fā)送，您也可以直接我司在線客服索取?？头?/p>

中文名稱：FUT5抗體

英文名稱：Anti-FUT5抗體

產(chǎn)品編號：BYK-10182R

保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

規(guī)格：0.1ml/0.2ml

濃度：1mg/1ml

抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等

克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

別名：UT5_HUMAN; Alpha-(1,3)-fucosyltransferase; Fucosyltransferase 5; Fucosyltransferase V; Fuc-TV; FucT-V; Galactoside 3-L-fucosyltransferase.

Anti-FUT5抗體,FUT5抗體產(chǎn)品介紹：The protein encoded by this gene belongs to the glycosyltransferase family. It is localized to the golgi, and catalyzes the last step in the biosynthesis of Lewis X (LeX) antigen, the addition of a fucose to precursor polysaccharides. This protein is one of the few fucosyltransferases that synthesizes the LeX oligosaccharide (CD15) expressed in the organ buds progressing in mesenchyma during embryogenesis. It is also responsible for the expression of CD15 in mature granulocytes. A common haplotype of this gene has also been associated with susceptibility to placental malaria infection.

Western Blotting 具體實(shí)驗(yàn)步驟
Western，也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡，是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
Western可以參考如下步驟進(jìn)行操作：
1、收集蛋白樣品(Protein sample preparation)
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白，例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等，可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白，也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后，為確保每個(gè)蛋白樣品的上樣量*，需要測定每個(gè)蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同，需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
2、電泳(Electrophoresis)
（1）、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制，也可以使用博研生物生產(chǎn)的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
（2）、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積，在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制，也可以使用我公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘，以充分變性蛋白。
（3）、上樣與電泳
冷卻到室溫后，把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果，以及判斷蛋白分子量大小，使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時(shí)通常*在上層膠時(shí)使用低電壓恒壓電泳，而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時(shí)使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置，低電壓可以設(shè)置在80-100V，高電壓可以設(shè)置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見，也可以采用整個(gè)SDS-PAGE過程恒壓的方式，通常把電壓設(shè)置在100V，然后設(shè)定定時(shí)時(shí)間為90－120分鐘。設(shè)置定時(shí)可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過頭。
通常電泳時(shí)溴酚藍(lán)到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳，或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況，預(yù)計(jì)目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
3、轉(zhuǎn)膜(Transfer)
我們*在Western實(shí)驗(yàn)中選用PVDF膜。硝酸纖維素膜(NC膜)或PVDF膜（二氟化樹脂膜膜孔徑：0.45um)也可以使用，但硝酸纖維素膜比較脆，在操作過程中特別是用鑷子夾取等過程中容易裂開。膜的使用請參考生產(chǎn)商的*使用步驟。
通常如果使用Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)濕式轉(zhuǎn)膜裝置，可以設(shè)定轉(zhuǎn)膜電壓120V，轉(zhuǎn)膜時(shí)間為30-60分鐘。具體的轉(zhuǎn)膜時(shí)間要根據(jù)目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的轉(zhuǎn)膜時(shí)間越長，目的蛋白的分子量越小，需要的轉(zhuǎn)膜時(shí)間越短。
在轉(zhuǎn)膜過程中，特別是高電流快速轉(zhuǎn)膜時(shí)，通常會有非常嚴(yán)重的發(fā)熱現(xiàn)象，把轉(zhuǎn)膜槽放置在冰浴中進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。轉(zhuǎn)膜的效果可以觀察所使用的預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)，通常分子量zui大的1-2條帶較難全部轉(zhuǎn)到膜上。轉(zhuǎn)膜的效果也可以用麗春紅染色液對膜進(jìn)行染色，以觀察實(shí)際的轉(zhuǎn)膜效果。也可以用考馬斯亮藍(lán)快速染色液對完成轉(zhuǎn)膜的SDS-PAGE膠進(jìn)行染色，以觀察蛋白的殘留情況。
4、封閉(Blocking)
轉(zhuǎn)膜完畢后，立即把蛋白膜放置到預(yù)先準(zhǔn)備好的Western洗滌液中，漂洗1-2分鐘，以洗去膜上的轉(zhuǎn)膜液。從轉(zhuǎn)膜完畢后所有的步驟，一定要注意膜的保濕，避免膜的干燥，否則極易產(chǎn)生較高的背景。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，加入Western封閉液，在搖床上緩慢搖動(dòng),室溫封閉60分鐘。對于一些背景較高的抗體，可以在4℃ 封閉過夜。
5、一抗孵育(Primary antibody incubation)
參考一抗的說明書，按照適當(dāng)比例用Western一抗稀釋液稀釋一抗。
用微型臺式真空泵吸盡封閉液，立即加入稀釋好的一抗，室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)孵育一小時(shí)。如果一抗孵育一小時(shí)效果不佳，可以在4℃緩慢搖動(dòng)孵育過夜。回收一抗。加入Western洗滌液，在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。
6、二抗孵育(Secondary antibody inucubation)
參考二抗的說明書，按照適當(dāng)比例用Western二抗稀釋液稀釋辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗。
用微型臺式真空泵吸盡洗滌液，立即加入稀釋好的二抗，室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)孵育一小時(shí)?；厥斩?，加入Western洗滌液，在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后，再加入洗滌液，洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。
7、蛋白檢測(Detection of proteins)
參考相關(guān)說明書，使用BeyoECL, Western 熒光檢測試劑等ECL類試劑來檢測蛋白。
洗片時(shí)可以使用X光片自動(dòng)洗片機(jī)。如果沒有自動(dòng)洗片機(jī)，可以用顯影定影試劑盒自行配制顯影液和定影液進(jìn)行手工洗片。
8、膜的重復(fù)利用(Membrane recovery)
如果蛋白樣品非常寶貴，可以使用Western一抗二抗去除液處理蛋白膜，以重復(fù)利用蛋白膜。

相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

TNFSF18/GITR Ligand(Tumor necrosis factor ligand superfamily member 18)  腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體
HVEM/TNFBYK14(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14)  腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體
*mt（Topoisomerase (DNA) I, mitochondrial)  線粒體DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體
TP2A/TOP2 alpha（DNA Topoisomerase Ⅱalpha)  DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體
TOPOⅡα/DNA TPⅡα (DNA topoisomeraseⅡα)  DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體
TPH (Trptophan YMdroxylase)  *羥化酶抗體
TPO (TYMroid Peroxidase)  兔抗甲狀腺過氧化物酶抗體
TRA16(TR4 orphan receptor associated 16 kDa protein)  睪wan激素受體相關(guān)蛋白16抗體
TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein)  睪wan激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白抗體
TRADD （TNF receptor 1 associated via death domain）  有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體
TRAF1/TNF-R1 （TNF receptor-associated factor 1）  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體
TRAF2/TNF-R2 （TNF receptor-associated factor 2）  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein)  CD40結(jié)合蛋白/腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白3抗體
TRAF6 (TNF receptor-associated factor 6)  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand)  腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗體
TranstYMretin (TTR/prealbumin)  轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體
TRBF1/TRF1 (omeric repeat binding factor 1)  端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體
TRF(Transferrin)   抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體
TRF2（omere repeat binding factor 2）  端粒結(jié)合蛋白2抗體
omerase Binding Protein，P23  端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
TRIM32(tripartite motif protein 32)  TRIM32抗體
TrK A (Tyrosine kinase,TrkA)  *激酶A抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
TrK A.B.C/TrK(Tyrosine kinase,TrkA.B.C)  *激酶A.B.C抗體
Trk B(Tyrosine kinase,Pyk2)  *激酶B抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Trk B(Tyrosine kinase,TrkB)  *激酶B抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)