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閱讀:136發(fā)布時(shí)間:2017-8-30
ELISA實(shí)驗(yàn)不顯色的原因,很多科研新手,可能都有這樣子的困擾,對(duì)于elisa實(shí)驗(yàn)做的不理想,不顯色也有很多無(wú)奈,下面我們金益柏的操作人員就給您介紹一些詳細(xì)的elisa不顯色的原因以及處理方法。
ELISA實(shí)驗(yàn)不顯色的原因圖片
ELISA實(shí)驗(yàn)不顯色的原因:
1.包被原:包括你的包被液有無(wú)問(wèn)題,有沒(méi)有配錯(cuò)。包被原一般加100微升,37度2小時(shí);
2.封閉:封閉液用的是否適合?你說(shuō)做了幾次都沒(méi)顯色,空白孔也不顯嗎?如果空白也無(wú)顏 色,那封閉就沒(méi)有問(wèn)題。一般封閉是200微升每孔,也可以滿孔封閉
3.一抗:檢查你的一抗是否失效。是否是在37度反應(yīng)
4.二抗:底物,底物緩沖液……這些都要好好檢查!
5.洗滌:用PBST洗滌,包被和封閉時(shí)洗板3次;一抗二抗洗滌5次,每次間隔3分鐘。手工和機(jī)器洗滌沒(méi)什么不同,就是省力一些。洗5次不會(huì)有負(fù)影響,在一抗和二抗洗滌過(guò)程中,恰恰需要多洗幾次,這樣有助于減少非特異性吸附。
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