在ELISA中除了包被外，一般需進(jìn)行4-5次加樣。在定性測定中有時不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性，例如規(guī)定為加樣一滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管，保持準(zhǔn)確的加樣姿勢，使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出現(xiàn)氣泡。

　　ELISA中加樣須注意如下問題：

　　1.吸取樣品時，加樣槍吸頭不應(yīng)黏附多余的液體;加樣時不可90度向孔中滴加液體，這樣會導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，加樣不準(zhǔn)確!

　　2.不要將吸頭伸入孔中，一方面若接觸孔底可能壓彎吸頭，另一方面可能會將孔中的液體吹起來，加樣不準(zhǔn)確!

　　正確的加樣方法應(yīng)為45度，吸頭貼著孔壁加入，應(yīng)注意：

　　1.角度太小，會使液體殘留在孔壁上，導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確!

　　2.吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處。