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技術(shù)文章

保護(hù)柱的選擇,如何選擇液相色譜儀保護(hù)柱及使用方法

閱讀:28          發(fā)布時(shí)間:2025-1-17
  怎樣選擇保護(hù)柱,但又不影響分離分析?通常,在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔,對(duì)于大部分分析工作者來說,一只1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是,如果樣品非常不清潔,或工作中發(fā)現(xiàn)經(jīng)常要更換1cm的保護(hù)柱,那么就應(yīng)該選用2cm或3cm的保護(hù)柱,保護(hù)柱越長自然所裝填的色譜填料就越多,則其保護(hù)性能越好,當(dāng)然隨著保護(hù)柱長度的增加,樣品的保留時(shí)間也相應(yīng)增加,一般來說,保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析色譜柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)即可。 保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要,目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱,使用過程簡單方便,而且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行干裝。但是,其zui大的缺點(diǎn)是不經(jīng)濟(jì),特別是針對(duì)中國的具體情況,一次性使用相對(duì)費(fèi)用較高。另外,薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限,只能提供很有限的保護(hù)作用;不過也因?yàn)樗b填的色譜填料較少,保護(hù)柱的長度也較短,所以對(duì)分析樣品的保留時(shí)間的影響也很小。 另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實(shí)質(zhì)是縮短了色譜分析柱,設(shè)計(jì)方式上有直連式/手緊式或整體式。整體式設(shè)計(jì)是由色譜柱的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的,必須與色譜分析柱一同訂貨,可以非常方便的使用,但不能被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可以在任何時(shí)候由色譜工作者來安裝連接,可以與任何品牌的色譜柱連接使用,而且可以根據(jù)不同的樣品選擇合適的保護(hù)柱長度。手緊式保護(hù)柱從結(jié)構(gòu)上講是與直連式保護(hù)柱一樣,只是在連接時(shí)不用借助扳手等工具,直接用手上緊即可。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)的角度看,保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯,現(xiàn)在大多數(shù)的保護(hù)柱均可以更換柱芯,可以降低保護(hù)柱的使用成本。 大多數(shù)人是根據(jù)色譜分析柱的填料來選擇保護(hù)柱的填料,正常情況下可以選擇與分析色譜柱一樣的色譜填料。但是,根據(jù)實(shí)際的分析工作,也可不必與分析色譜柱的填料匹配。 對(duì)于選擇保護(hù)柱的原則是:在滿足分離分析要求的前提條件下,盡可能的選擇較短的保護(hù)柱,盡可能選擇對(duì)分離樣品小一些保留性的填料。
 
  高效液相色譜儀緩沖鹽使用不當(dāng)?shù)暮蠊?br /> 
  在高效液相色譜儀分析過程中,緩沖液是的,因?yàn)橐盟鼇碚{(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值,緩沖鹽使用不當(dāng),后果可是吃不了兜著走。比如說,液相色譜儀的色譜柱壓升高、柱效下降、保留時(shí)間異常等等不良影響:
 
  1、柱壓升高;
 
  原因:緩沖鹽使用不當(dāng)導(dǎo)致緩沖鹽析出,堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙,阻礙流動(dòng)相傳質(zhì),引起柱壓升高。
 
  2、相同化合物的保留時(shí)間發(fā)生變化;
 
  原因:如果沒有沖洗干凈就進(jìn)行進(jìn)樣,色譜柱內(nèi)含有的鹽會(huì)使化合物的保留時(shí)間發(fā)生變化。
 
  3、柱效下降;
 
  原因:
 
  i、有些緩沖鹽會(huì)滲入到鍵合相的深處,損害硅膠基體,導(dǎo)致色譜柱鍵合相流失,柱床變松,柱效下降;
 
  ii、凝結(jié)在鍵合相表面,使C18碳鏈難以舒展,對(duì)物質(zhì)的保留能力下降,導(dǎo)致柱效下降。因此液相色譜儀用過緩沖鹽后需要對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗,水中緩沖鹽濃度較大時(shí)應(yīng)特別引起注意。

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