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閱讀：3151發(fā)布時(shí)間：2017-9-4
現(xiàn)代的細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)具有固定的培養(yǎng)基配方，如DMEM、RPMI1640。它們大多屬于經(jīng)典培養(yǎng)基。它們是如何發(fā)展起來(lái)的？
許多人做實(shí)驗(yàn)只養(yǎng)一兩種細(xì)胞，也許只遇到一兩種培養(yǎng)基。但在歷*積累起來(lái)的經(jīng)典培養(yǎng)基實(shí)際上已至少有十幾種。回顧這些培養(yǎng)基，也許能看到前人為發(fā)展細(xì)胞培養(yǎng)而做出的一些努力。
圖 細(xì)胞培養(yǎng)的三個(gè)奠基人：（左）Harry Eagle，（中）Renato Dulbecco，（右）Theodore T. Puck
zui早的經(jīng)典培養(yǎng)基是BME，是由美國(guó)生理學(xué)家Harry Eagle（1905-1992）在1955年開(kāi)發(fā)的，用于培養(yǎng)HeLa細(xì)胞和小鼠成纖維細(xì)胞。他發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞體外生長(zhǎng)所必需的zui低營(yíng)養(yǎng)，這就是BME的配方。它由氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、D-葡萄糖和酚紅組成。其中維生素有9種，氨基酸有13種，包括10種必需氨基酸、半*、*和*。
BME之后出現(xiàn)了一種改良型，即MEM。
MEM可同時(shí)用于貼壁和懸浮細(xì)胞，可培養(yǎng)HeLa, BHK-21, 293, MCF-7細(xì)胞等。它是由Harry Eagle在BME配方基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的。之后誕生了MEM培養(yǎng)基的改良配方，如GMEM、a-MEM和DMEM。
圖 （左）正常細(xì)胞。 （右）轉(zhuǎn)化細(xì)胞
DMEM即意大利生理學(xué)家Dulbecco改良的Engle培養(yǎng)基。DMEMzui常用，能支持很多貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)，包括原代的成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元、HUVECs、平滑肌細(xì)胞以及一些細(xì)胞系如Hela（常用于癌癥和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究）、293（常用于外源蛋白表達(dá)）、Cos-7（常用于轉(zhuǎn)染研究）等。
DMEM所含維生素的濃度大約是MEM的4倍，所含氨基酸大約比MEM高1倍，氨基酸種類則多3種，可以說(shuō)營(yíng)養(yǎng)更為豐富。
GMEM所含的氨基酸和維生素濃度比BME高1倍。它zui初是MEM加上10％的磷酸胰蛋白?，用于培養(yǎng)BHK-21細(xì)胞，以及用于研究影響細(xì)胞增殖能力的遺傳因素。
圖 鏡下免疫熒光染色后呈現(xiàn)的細(xì)胞
a-MEM也是MEM的改良型，包括非必需氨基酸、丙酮酸鈉、*、*12、*和抗壞血酸，可培養(yǎng)角質(zhì)細(xì)胞、原代大鼠星形細(xì)胞等。
Ham F-12培養(yǎng)基大約是在1965年由Ham引入，用于無(wú)血清培養(yǎng)CHO細(xì)胞（CHO細(xì)胞是美國(guó)遺傳學(xué)家Theodore T.Puck于1957年從一成年雌性倉(cāng)鼠卵巢分離獲得的，在生物工程上應(yīng)用廣泛）。和其他基礎(chǔ)培養(yǎng)基相比，F(xiàn)-12含有的成分更廣泛，包括鋅、腐胺、次黃嘌呤和胸苷，還可用于培養(yǎng)軟骨細(xì)胞和前列腺上皮細(xì)胞。
M199zui初是用于雞胚成纖維細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)研究。 它具有廣泛的物種適用性，特別是用于培養(yǎng)未轉(zhuǎn)化細(xì)胞。M199廣泛用于病毒學(xué)和疫苗生產(chǎn)。與其他基礎(chǔ)培養(yǎng)基相比，培養(yǎng)基199含有*的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶和其他維生素。
RPMI 1640主要用于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞。它含有還原劑*和高濃度維生素（如肌醇、*），還包括*、*12等MEM、DMEM沒(méi)有包含的成分。
需要指出的是，經(jīng)典培養(yǎng)基都不含蛋白質(zhì)、脂類和生長(zhǎng)因子，因此需要配合胎牛血清一起使用。
推薦參考資料：
Joseph G. Gall, J. Richard McIntosh. Landmark Papers in Cell Biology: Selected Research Articles Celebrating Forty Years of The American Society for Cell Biology. Cold Spring Harbor Laboratory Press （December 2000）
Ham, R. G. Clonal growth of mammalian cells in a chemically defined synthetic medium, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1965, 53:288-293.
商鋪：http://www.kytsldc.cn/st556336/
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