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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采納和保留

閱讀:262發(fā)布時(shí)間:2017-9-5

ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采納和保留

優(yōu)異的試劑,良好的儀器和的操作是確保ELISA檢查成果牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不一樣而有所區(qū)別,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)通常均用板式點(diǎn)。
這篇文章將敘說(shuō)板式ELISA試劑盒各個(gè)操作過程的留意關(guān)鍵,珠式、管式及磁性球ELSIA,國(guó)外試劑均與特別儀器合作使用,兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵循規(guī)則操作,必能得出的成果。
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。大多數(shù)ELISA檢查均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清自然凝結(jié)、除特別情況外,在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢查標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等使用。
血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本也許會(huì)添加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢查。如有細(xì)菌污染,菌體中也許富含內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)作假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保留過久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。通常說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測(cè)定的需低溫冰存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢查。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢查,宜少數(shù)分裝冰存。保留血清自收集時(shí)就應(yīng)留意無(wú)菌操作,也可參加恰當(dāng)防腐劑。

 


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