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江蘇菲亞生物科技有限公司
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雞血清的制備與解凍方式
2019-9-20 閱讀(8730)
雞血清作為輔料加入制備副雞嗜血桿菌或禽多殺巴氏桿菌等細菌的培養(yǎng)基之一， 主要應(yīng)用于細菌培養(yǎng)，現(xiàn)市場購買雞血清，價格高，質(zhì)量參差不齊，往往影響生產(chǎn)的穩(wěn)定性和半成品的含菌量。
雞血清的制備大致可分為以下幾個步驟：
(1)雞血用離心機離心，收集濾過液，凍存；
(2)7-10天后取出化凍，用離心機離心后取上清液，冷凍保存；
(3)凍存3— 5天后，取出放在溫室中將血清化開，進行兩次粗濾澄清；
(4)過濾除菌；
(5)室溫放置，然后置于37°C環(huán)境培養(yǎng)M小時，即得。
雞血清解凍：將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀)，先置于2～8℃區(qū)域中使之融化，然后在室溫下使之全融。
使用前再預(yù)溫到將使用的溫度(如37℃)，但必須注意的是，解凍過程中應(yīng)輕輕地搖晃均勻。血清在解凍過程中可能會出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物，主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出，但這些析出物，并不影響血清本身的質(zhì)量。
若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。
雞血清保存方法：
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學成分的分析，都以血清為樣品。
