上海研盟生物科技有限公司Anti-PACAP receptor抗體*,主要應用于WB、IHC、IF、ELISA、流式細胞術等實驗中。說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接我司在線客服索取。客服:.
各種HRP酶標記成抗體的效價測定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效價測定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C過夜;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀釋的HRP標記抗體 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 測定OD值;
10、陽性OD值比對照值大3倍,為判斷效價稀釋度。
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體,Anti-PACAP receptor抗體簡單介紹:
英文名稱:Anti-PACAP receptor antibody
中文名稱:腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體
產品別名:ADCYAP1 R1; ADCYAP1R 1; PACAP-R1; adenylate cyclase activating polypeptide 1 (pituitary) receptor type 1; PAC 1; PAC1; PAC1R; PACAP R 1; PACAP1 R; PACAPR; PACAPRI; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide 1 receptor type I Hiphop; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide receptor; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide type I receptor precursor; PACR_HUMAN.
產品規(guī)格:0.1ml、0.2ml、1ml
產品用途:科研實驗
產品價格:請報價
說明書:請?zhí)砑涌头苯铀魅?/p>
抗體來源:該指標有兩種產品,一種是兔來源抗體,一種是鼠來源抗體
克隆類型:兔來源為多克隆抗體,鼠來源單克隆抗體
交叉反應:請索取說明書查看
性 狀:Lyophilized or Liquid
濃 度:1mg/1ml
亞 型:IgG
純化方法: affinity purified by Protein A
儲 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
背景介紹: Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) is a neuropeptide belonging to the vasoactive intestinal polypeptide/glucagon/ secretin family. It is widely distributed in the body, and a variety of biological actions have been reported. Recent studies have shown that there is a family of PACAP receptors (PACAPRs), and two members of this family have been identified. This is a receptor for PACAP-27 and PACAP-38. The activity of this receptor is mediated by G proteins which activate adenylyl cyclase. May regulate the release of adrenocorticotropin, luteinizing hormone, growth hormone, prolactin, epinephrine, and catecholamine. May play a role in spermatogenesis and sperm motility. Causes smooth muscle relaxation and secretion in the gastrointestinal tract (By similarity). Belongs to the G-protein coupled receptor 2 family.
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體保存條件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
組織固定時間和所需的抗原熱修復的關系
大量的實驗表明,固定時間越長的標本,它所形成的橋連就越緊密,抗原就越難以被激活,所需要的修復強度也就越強。有意思的是隨著固定時間的延長,組織中蛋白對溫度的耐受也相應增高,這可能就是我們對固定時間長的標本加大修復強度的理論基礎。
這就提醒我們在做回顧性的研究時一定要注意所使用的修復條件,它與新鮮標本的修復條件一定是有所區(qū)別的,同等條件下一定要加長修復的時間或提高修復所使用的溫度,才可能得到比較滿意的結果。
不同pH值抗原修復液對染色結果的影響
抗原熱修復中所使用的修復液pH值也會對染色結果產生相當大的影響。
pH值對染色結果的影響大概可以分為以下四種情況:
A.穩(wěn)定型,pH值對染色結果影響不大,如PCNA、AE1、EMA、CD20等;
B.V型,高pH值和低pH值染色較好,而pH值4-5染色結果較差,如ER、Ki-67等;
C.上升型,隨著pH值的增加,染色結果逐漸增強,如HMB45等;
D.下降型,隨著pH值的增加染色結果逐漸減弱,當然這種類型的抗體只是個別的現(xiàn)象,如MOC31。
一個有趣的現(xiàn)象值得注意,即在高pH值都有較好的染色結果,所以目前比較推崇的抗原修復液為高pH值得修復液,如1mMEDTA, pH8.0或pH9.0等。但是由于傳統(tǒng)習慣,絕大多數(shù)醫(yī)院和實驗室都在使用pH6.0的枸櫞酸緩沖液。綜合以上各種抗體的染色狀況,考慮到臨床工作的實際情況,許多國外免疫組化專家建議,在常規(guī)的免疫組化工作中,全部選用高pH值得修復液來代替目前廣為使用的pH6.0枸櫞酸緩沖液。為此,本公司已經推出pH8.0和pH9.0的新型抗原修復液。經驗證,絕大多數(shù)的抗體使用pH9.0得修復液效果都要優(yōu)于pH6.0的枸櫞酸,尤其是核陽性的抗體。所以,在常規(guī)的免疫組化工作中,使用高pH值的抗原修復液是今后的必然趨勢。
腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體,Anti-PACAP receptor抗體部分實驗介紹:
有關免疫組化實驗的重要問題
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生li鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細胞內蛋白質凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質,并保持細胞原有的形態(tài)結構
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對于陳舊性標本或固定時間過長的標本,更應注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強切片,但染色效果差,染色時也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當組織中全部被透明劑占有時,光線可以透過,組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進行,但返工時往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時間根據(jù)組織的類型可適當調整,一般原則較小組織脫水時間和浸蠟時間較短;骨、肌肉等堅硬組織脫水和浸蠟時間不宜過長;脂肪組織、疏松結締組織脫水和浸蠟時間需增加
7.包埋包埋時應注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內或石蠟中混有透明劑,或包埋時動作太慢或石蠟凝固太慢所致,所以冷卻時水溫不能過高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
(二)抗原修復
組織在制作過程中,由于固定液的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過程中不能將其顯示出來,為了解決上述的問題,利用化學試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來或修正過來的過程稱為抗原修復。
上海研盟生物科技有限公司常用的抗原修復液有:0.01M枸櫞酸(pH6.0)、0.05M EDTA(pH8.0)、0.01M TBS(pH7.4)、*、*
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