背景介紹：Cytokeratins (CK) are intermediate filaments of epithelial cells, both in keratinising tissue (ie., skin) and non keratinising cells (ie., mesothelial cells). Although not a traditional marker for endothelial cells, cytokeratins have also been found in some microvascular endothelial cells. At least 20 different cytokeratins (CK) in the molecular range of 40 to 70 kDa and isoelectric points of 5 to 8.5 can be identified using two dimensional gel electrophoresis. Biochemically, most members of the CK family fall into one of two classes, type I (acidic polypeptides) and type II (basic polypeptides). At least one member of the acidic family and one member of the basic family is expressed in all epithelial cells. Defects in KRT5 are a cause of epidermolysis bullosa simplex.

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中文名稱：細(xì)胞角蛋白5抗體

英文名稱：Anti-Cytokeratin 5 antibody

細(xì)胞角蛋白5抗體，Anti-Cytokeratin 5抗體-有關(guān)免疫組化實(shí)驗(yàn)的重要問題

（一）組織材料處理

1.取材要取新鮮組織，大小合適，用生理鹽水洗凈

2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中（常用的有4%多聚甲醛），使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì)，并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)

3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去，以利于進(jìn)行脫水，若組織中留有較多的固定液，則將影響脫水劑，甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察，對(duì)于陳舊性標(biāo)本或固定時(shí)間過長(zhǎng)的標(biāo)本，更應(yīng)注意流水沖洗。

4.脫水脫水必須*，若脫水不盡，則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮，蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象，雖可勉強(qiáng)切片，但染色效果差，染色時(shí)也容易脫落

5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟，所以浸蠟之前需要一個(gè)既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑，以便使石蠟浸入到組織中去，當(dāng)組織中全部被透明劑占有時(shí)，光線可以透過，組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài)，此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明，表明脫水未盡必須重新返工，否則影響到浸蠟的進(jìn)行，但返工時(shí)往往效果不好

6.浸蠟浸蠟時(shí)間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整，一般原則較小組織脫水時(shí)間和浸蠟時(shí)間較短；骨、肌肉等堅(jiān)硬組織脫水和浸蠟時(shí)間不宜過長(zhǎng)；脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時(shí)間需增加

7.包埋包埋時(shí)應(yīng)注意組織的包埋方向，否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)*，包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀，如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶，這種蠟塊不能切除薄的切片?？赡苁墙M織脫水不充分，組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑，或包埋時(shí)動(dòng)作太慢或石蠟?zāi)烫?，所以冷卻時(shí)水溫不能過高，否則就不宜迅速凝固

8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷，切出的切片連續(xù)性較好，有利于展片，一般切片厚度4-6um

規(guī)格：0.1ml/0.2m

濃度：1mg/1ml

抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等

克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗

產(chǎn)品類型：一抗

細(xì)胞角蛋白5抗體，Anti-Cytokeratin 5抗體簡(jiǎn)單介紹：

別 名：Cytokeratin 5; Keratin, type II cytoskeletal 5; CK-5; CK5; Keratin-5; K5; 58 kDa cytokeratin; KRT5; CK 5; DDD; EBS 2; EBS2; K5; Keratin 5 (epidermolysis bullosa simplex Dowling-Meara/Kobner/Weber-Cockayne types); Keratin 5; Keratin Type II Cytoskeletal 5; Keratin5; KRT 5; KRT 5A; KRT5. 

此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售，相關(guān)標(biāo)記有：Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記

常用的抗原修復(fù)方法：

方法1：沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫。

方法2：微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，?；?min，中火5min，自然冷卻至室溫。

方法3：高壓修復(fù)，修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰，放入玻片，封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時(shí)開始計(jì)時(shí)修復(fù)2min，自然冷卻至室溫。

方法4：使用*修復(fù)，將*修復(fù)液加入到組織上，37℃，消化30min

抗原修復(fù)，必須注意以下問題：

1、修復(fù)液的選擇。

0.01M枸櫞酸（pH6.0）：應(yīng)用zui多的抗原修復(fù)液，適用于大多數(shù)的抗原，用該液修復(fù)后的抗原表達(dá)增強(qiáng)，抗原的定性和定位很理想，結(jié)果不錯(cuò);

0.05M EDTA（pH8.0）：應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液，修復(fù)能力較強(qiáng)，對(duì)于保存時(shí)間較長(zhǎng)的切片或目的蛋白表達(dá)較弱的組織有很好的修復(fù)效果，需要控制好修復(fù)時(shí)間，否則容易出現(xiàn)較重的背景;

0.01M TBS（pH7.4）：中性修復(fù)液，適用于大多數(shù)抗原，對(duì)于核定位蛋白有較好的修復(fù)效果;

*：應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液，適用于大多數(shù)的抗原，使用溫度37℃，對(duì)于容易脫片的切片有很好的保護(hù)作用。

*：應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液，適用于大多數(shù)的抗原

2.抗原熱修復(fù)時(shí)應(yīng)選擇溫度。

據(jù)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為溫度在92℃－98℃是合適的，尤其在95℃為，這是因?yàn)椋海?）這種溫度未達(dá)沸騰，切片不容易脫離載玻片；（2）能夠解離和破壞與蛋白交聯(lián)的甲醛醛鍵等，處理時(shí)可以隨意選擇和確定抗原修復(fù)的作用時(shí)間。如果選擇高壓修復(fù)，因?yàn)闇囟容^高，時(shí)間不宜過長(zhǎng)

3.抗原修復(fù)時(shí)有效溫度所需持續(xù)時(shí)間根據(jù)各單位的設(shè)備條件以及使用的儀器不同，抗原修復(fù)時(shí)在有效的溫度范圍內(nèi)所持續(xù)的時(shí)間也不一樣。

4.抗原修復(fù)液必須遵循自然降溫規(guī)律，否則效果不好或達(dá)不到抗原修復(fù)的目的。

5.盡量使用足量的抗原修復(fù)液，防止切片干涸。

6.切片必須附貼牢固，否則發(fā)生掉片。

細(xì)胞角蛋白5抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。

免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標(biāo)記的抗體孵育在同一張切片上，鏡下觀察時(shí)將不同的顏色組合在一起，將不同的抗原表達(dá)情況一起呈現(xiàn)出來，這樣分析多個(gè)抗原的關(guān)聯(lián)性更客觀、更直接。

熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標(biāo)記的兩個(gè)抗體同時(shí)孵育后觀測(cè)；間接法需要用到兩個(gè)不同種屬來源的一抗（例如一個(gè)鼠源抗體，一個(gè)兔源抗體），后面要選擇與一抗相對(duì)應(yīng)的二抗同時(shí)需要帶有不同的熒光素標(biāo)記（例如FITC標(biāo)記山羊抗小鼠和Cy3標(biāo)記山羊抗兔），間接法需要同時(shí)兼顧一抗和二抗的種屬關(guān)系，避免出現(xiàn)相互的交叉反應(yīng)。

相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

Anti-ARPC1A抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體
Anti-ARPC2抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2抗體
Anti-ARPC4抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體
Anti-ARPM1抗體,肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體
Anti-ARSI抗體,芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體
Anti-ART1抗體,腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體
Anti-ARVCF抗體,精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體
Anti-ALDH1抗體,乙醛脫氫酶1型抗體
Anti-phospho-Ataxin 1(Ser775),磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
Anti-phospho-ATF1(Ser63),磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體
Anti-phospho-ATF2(Ser480),磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
Anti-phospho-ATF2(Thr71),磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
Anti-ATF5抗體,活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體
Anti-ATF6 beta抗體,活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體
Anti-ATIC抗體,AICAR甲?；D(zhuǎn)移酶抗體
Anti-phospho-ATM(Ser794),磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
Anti-ATP5E抗體,ATP5E蛋白抗體
Anti-ATP5G2抗體,ATP5G2蛋白抗體
Anti-ATP6V0D2抗體,ATP6V0D2蛋白抗體
Anti-ATP6V1B2抗體,ATP6V1B2蛋白抗體
Anti-ATPIF1抗體,ATPIF1蛋白抗體
Anti-Attractin抗體,Attractin蛋白抗體
Anti-Phospho-Aurora B(Tyr12),磷酸化有絲分裂激酶B抗體