背景介紹:Densin-180 is a synaptic transmembrane protein that is tightly associated with the postsynaptic density in CNS neurons and is postulated to function as a synaptic adhesion molecule. Densin-180 is a brain-specific momber of the O-sialoglycoprotein family which is highly concentrated at synapses along dendrites. The sequence of densin-180 contains 17 leucine-rich repeats, a sialomucin domain, an apparent transmembrane domain, and a PDZ (PSD-95, DIg, Z0-1) domain. The PDZ domain contributes to its binding to a-actinin. The intracellular portion of densin-180, CaMKIIa, interacts with a-actinin at distinct binding sites and, together, they form a ternary complex stabilized by multiple interactions.
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中文名稱:層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體
英文名稱:Anti-LAP1 antibody
層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體,Anti-LAP1抗體-有關(guān)免疫組化實驗的重要問題
(一)組織材料處理
1.取材要取新鮮組織,大小合適,用生理鹽水洗凈
2.固定固定就是把病理標(biāo)本組織浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使組織或細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝聚、沉淀或變性成為不溶性物質(zhì),并保持細(xì)胞原有的形態(tài)結(jié)構(gòu)
3.洗滌固定后一定要把滲透到組織里面的固定液洗去,以利于進行脫水,若組織中留有較多的固定液,則將影響脫水劑,甚至可在組織中發(fā)生沉淀而影響后續(xù)染色及觀察,對于陳舊性標(biāo)本或固定時間過長的標(biāo)本,更應(yīng)注意流水沖洗。
4.脫水脫水必須*,若脫水不盡,則切片后組織與空氣接觸即干燥收縮,蠟塊切面出現(xiàn)凹陷現(xiàn)象,雖可勉強切片,但染色效果差,染色時也容易脫落
5.透明乙醇等脫水劑不能溶解石蠟,所以浸蠟之前需要一個既能與乙醇混合又能溶解石蠟的媒劑,以便使石蠟浸入到組織中去,當(dāng)組織中全部被透明劑占有時,光線可以透過,組織可呈現(xiàn)不同程度的透明狀態(tài),此現(xiàn)象稱為透明。如果組織不能透明,表明脫水未盡必須重新返工,否則影響到浸蠟的進行,但返工時往往效果不好
6.浸蠟浸蠟時間根據(jù)組織的類型可適當(dāng)調(diào)整,一般原則較小組織脫水時間和浸蠟時間較短;骨、肌肉等堅硬組織脫水和浸蠟時間不宜過長;脂肪組織、疏松結(jié)締組織脫水和浸蠟時間需增加
7.包埋包埋時應(yīng)注意組織的包埋方向,否則將影響組織切片的形態(tài)。包埋用的石蠟要和浸蠟用的石蠟熔點*,包埋用的石蠟溫度要稍高于浸蠟的溫度。包埋好后可置于冷水中使石蠟迅速冷凝。包埋好的石蠟塊應(yīng)呈均勻的半透明狀,如出現(xiàn)白色渾濁則其中存在石蠟的結(jié)晶,這種蠟塊不能切除薄的切片??赡苁墙M織脫水不充分,組織內(nèi)或石蠟中混有透明劑,或包埋時動作太慢或石蠟?zāi)烫?,所以冷卻時水溫不能過高,否則就不宜迅速凝固
8.切片可以將制作好的蠟塊置于低溫環(huán)境預(yù)冷,切出的切片連續(xù)性較好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體,Anti-LAP1抗體簡單介紹:
別 名:Densin 180; Densin; Densin-180; densin180; DKFZp686I1147; KIAA1365; Lamin associated polypeptide 1; LAP 1; Leucine rich repeat containing 7; Leucine rich repeat containing protein 7; Leucine-rich repeat-containing protein 7; Lrrc 7; Lrrc7; LRRC7_HUMAN; MGC144918; OTTHUMP00000065336; OTTHUMP00000065337; OTTHUMP00000065338; Protein Lap 1; Protein lap1.
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
常用的抗原修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,自然冷卻至室溫。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,?;?min,中火5min,自然冷卻至室溫。
方法3:高壓修復(fù),修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時開始計時修復(fù)2min,自然冷卻至室溫。
方法4:使用*修復(fù),將*修復(fù)液加入到組織上,37℃,消化30min
抗原修復(fù),必須注意以下問題:
1、修復(fù)液的選擇。
0.01M枸櫞酸(pH6.0):應(yīng)用zui多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,用該液修復(fù)后的抗原表達增強,抗原的定性和定位很理想,結(jié)果不錯;
0.05M EDTA(pH8.0):應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,修復(fù)能力較強,對于保存時間較長的切片或目的蛋白表達較弱的組織有很好的修復(fù)效果,需要控制好修復(fù)時間,否則容易出現(xiàn)較重的背景;
0.01M TBS(pH7.4):中性修復(fù)液,適用于大多數(shù)抗原,對于核定位蛋白有較好的修復(fù)效果;
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原,使用溫度37℃,對于容易脫片的切片有很好的保護作用。
*:應(yīng)用較多的抗原修復(fù)液,適用于大多數(shù)的抗原
2.抗原熱修復(fù)時應(yīng)選擇溫度。
據(jù)實驗認(rèn)為溫度在92℃-98℃是合適的,尤其在95℃為,這是因為:(1)這種溫度未達沸騰,切片不容易脫離載玻片;(2)能夠解離和破壞與蛋白交聯(lián)的甲醛醛鍵等,處理時可以隨意選擇和確定抗原修復(fù)的作用時間。如果選擇高壓修復(fù),因為溫度較高,時間不宜過長
3.抗原修復(fù)時有效溫度所需持續(xù)時間根據(jù)各單位的設(shè)備條件以及使用的儀器不同,抗原修復(fù)時在有效的溫度范圍內(nèi)所持續(xù)的時間也不一樣。
4.抗原修復(fù)液必須遵循自然降溫規(guī)律,否則效果不好或達不到抗原修復(fù)的目的。
5.盡量使用足量的抗原修復(fù)液,防止切片干涸。
6.切片必須附貼牢固,否則發(fā)生掉片。
層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標(biāo)記的抗體孵育在同一張切片上,鏡下觀察時將不同的顏色組合在一起,將不同的抗原表達情況一起呈現(xiàn)出來,這樣分析多個抗原的關(guān)聯(lián)性更客觀、更直接。
熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標(biāo)記的兩個抗體同時孵育后觀測;間接法需要用到兩個不同種屬來源的一抗(例如一個鼠源抗體,一個兔源抗體),后面要選擇與一抗相對應(yīng)的二抗同時需要帶有不同的熒光素標(biāo)記(例如FITC標(biāo)記山羊抗小鼠和Cy3標(biāo)記山羊抗兔),間接法需要同時兼顧一抗和二抗的種屬關(guān)系,避免出現(xiàn)相互的交叉反應(yīng)。
相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
Anti-ABH1抗體,ALKB蛋白抗體
Anti-ACAA1抗體,乙酰*酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體
Anti-phospho-beta Actin(Tyr53),磷酸化β肌動蛋白抗體
Anti-ACSF4抗體,?;?合成酶家族4抗體
Anti-phospho-ABCA1(Ser2054),磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體
Anti-phospho-Aconitase 1(Ser138),磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
Anti-phospho-Aconitase 1(Ser711),磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
Anti-phospho-ACTH(Ser168),磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體
Anti-phospho-alpha Adducin(Thr445),磷酸化內(nèi)收蛋白抗體
Anti-phospho-AKT1(Ser246),磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
Anti-phospho-AKT1/3(Tyr473),磷酸化蛋白激酶B抗體
Anti-phospho-alpha Adducin(Ser436),磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
Anti-phospho-AMPK alpha 1(Ser487),磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
Anti-ASAH1抗體,酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體
Anti-AZI1抗體,中心體蛋白AZI1抗體
Anti-Annexin VI抗體,膜粘連蛋白6抗體
Anti-C2orf88抗體,2號染色體開放閱讀框88抗體
Anti-ARHGEF18抗體,G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體
Anti-APOD抗體,載脂蛋白D抗體
Anti-ADRM1抗體,粘附調(diào)節(jié)分子1抗體
Anti-ARHGEF11抗體,Rho鳥甘酸轉(zhuǎn)運蛋白抗體
Anti-alpha 1 Fetoprotein抗體,甲胎蛋白抗體
Anti-ADORA2B抗體,腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體