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上海李記生物科技有限公司


Alexa Fluor 555 標記鬼筆環(huán)肽（橘色）

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號C6243L0530

品       牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：蘇女士查看聯(lián)系方式

更新時間：2017-10-20 10:25:42瀏覽次數(shù)：240次

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產品簡介

本品為Alexa Fluor 555 標記鬼筆環(huán)肽（橘色），可發(fā)出高亮度、穩(wěn)定的橘色熒光，染色反應特異性強，對比性高，適合用作F-actin的定性和定量檢測。

詳細介紹

Alexa Fluor 555 標記鬼筆環(huán)肽（橘色）

產品名稱

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價格(元)

 Alexa Fluor 555 標記鬼筆環(huán)肽（橘色）

C6243L0530

300 T

-20℃

1950

Alexa Fluor 555 標記鬼筆環(huán)肽（橘色）運輸與保存方法

冰袋運輸。收到貨后-20℃避光干燥保存，1年有效。

使用方法：

1.   準備1000x DMSO Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽存儲液

用30µL DMSO 溶解粉末狀Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽，可按需分裝并于-20℃避光干燥保存，分裝保存，避免反復凍融。

2.   準備1x Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽工作液

吸取1µL 1000×Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽存儲液到1ml 含有1%BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。

注意：不同的細胞染色的情況不同，相應Alexa Fluor 555鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。

3. 細胞染色步驟

1）細胞培養(yǎng)過夜或更長，使其密度達到50-60%匯合度。

2）吸掉培養(yǎng)液，37℃預熱的1×PBS（pH 7.4）清洗細胞2次。

3）使用含有3-4%甲醛的PBS溶液進行細胞固定，室溫固定10-30min。

注意：避免固定劑中含有甲醇成分，因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。

4）室溫條件下，用PBS清洗固定好的細胞2~3次，每次10min。

5）（可選）：室溫條件下，用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3-5min，從而增加其通透性。

注意：鬼筆環(huán)肽的分子量小，很容易通過細胞，一般情況下不需對細胞進行冷丙酮和TRITON X-100處理。

6）室溫條件下，用PBS清洗細胞2~3次，每次10min。

7）每孔加入 Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽工作液100µl/孔（96孔板），室溫避光染色20-90min，夏季時間相對短些。

8）用PBS清洗細胞3次，每次5min，去除掉多余的Alexa Fluor 555標記鬼筆環(huán)肽。

9）（可選）：加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復染，如：100µl/孔（96孔板），室溫3~5min。用PBS清洗細胞2次，每次5min。

10）于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察，選擇Alexa FluorTM 555激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=556/574nm）和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片（Ex/Em=364/454nm）。


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