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細(xì)胞活躍快樂實用方法小結(jié)
2024-5-20 閱讀(47)
細(xì)胞，生物學(xué)名詞，生物體的結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。一般具有細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。植物細(xì)胞的細(xì)胞膜外還有細(xì)胞壁。體形極微，在顯微鏡下始能窺見。形狀多種多樣，主要由細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成，表面有薄膜。動植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)大致相同。植物細(xì)胞質(zhì)膜外有細(xì)胞壁，細(xì)胞壁中常有質(zhì)體，動物細(xì)胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細(xì)胞中則無。細(xì)胞有運動、營養(yǎng)和繁殖等機能。細(xì)胞是許多生物學(xué)實驗的主角。如果細(xì)胞心情不好，那么實驗的結(jié)果也不會好到哪兒去。讓細(xì)胞快樂下面就仔細(xì)了解一下吧。
1. 確保所有實驗室材料都無菌
交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是最輕微的污染，也可能毀了幾個星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌極易生長，因此必須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前，應(yīng)用酒精擦拭干凈，以避免污染。
2. 在使用前正確解凍細(xì)胞
盡管解凍看起來是個簡單的步驟，但必須操作得當(dāng)，以免傷害細(xì)胞。長時間暴露在高溫條件下會使細(xì)胞無法鋪板。因此，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋，以避免DMSO造成直接傷害。
3. 小心處理您的培養(yǎng)物
細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強調(diào)也不為過。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動可能會對生長產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動儀器。此外，盡量避免一次處理多個細(xì)胞系，因為它可能會影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析，以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。
4. 使用對數(shù)生長期的細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)過程共有3個階段：停滯期、對數(shù)期和平臺期，分別代表了低細(xì)胞生長、高細(xì)胞生長和無細(xì)胞生長。最有活力的細(xì)胞是健康的，快速分裂的，在對數(shù)期以70-80%的匯合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細(xì)胞*匯合
匯合度是指貼壁細(xì)胞占據(jù)培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài)，因為它意味著細(xì)胞不能繼續(xù)生長。不過，當(dāng)務(wù)之急是使用活躍生長的細(xì)胞。
6. 選擇最佳的培養(yǎng)基開發(fā)策略
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基是控制產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和成本的最重要因素。必須針對每種培養(yǎng)物來定制培養(yǎng)基，以優(yōu)化實驗結(jié)果。在決定以哪種方式來開發(fā)您的培養(yǎng)基時，您有幾個選擇。您可以購買現(xiàn)成的，自己開發(fā)，也可以與另一家公司合作開發(fā)特定的培養(yǎng)基。在這個過程中，您需要考慮時間和成本等因素。
