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上海邦景實業(yè)有限公司
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防止PCR實驗污染的方法
2025-3-11 閱讀(51)
進(jìn)行PCR操作時，操作人員應(yīng)該嚴(yán)格遵守一些操作規(guī)程，-大程度地降低可能出現(xiàn)的PCR污染或杜絕污染的出現(xiàn)。
一、劃分操作區(qū)：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現(xiàn)全閉管操作，但無論是否能夠達(dá)到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行：
l 試劑準(zhǔn)備區(qū)。
l 標(biāo)本制備區(qū)。
l PCR擴(kuò)增區(qū)及分析區(qū)。
切記：任何一間的產(chǎn)物及器材不要拿到其他兩個工作區(qū)。
二、分裝試劑：PCR擴(kuò)增所需要的試劑均應(yīng)在生物安全柜、裝有紫外燈的超凈工作臺或負(fù)壓工作臺配制和分裝。所有的加樣器和吸頭需固定放于其中，不能用來吸取擴(kuò)增后的DNA和其他來源的DNA：
n PCR用水應(yīng)為高壓的雙蒸水；
n 引物和dNTP用高壓的雙蒸水在無PCR擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)配制；
引物和dNTP應(yīng)分裝儲存，分裝時應(yīng)標(biāo)明時間，以備發(fā)生污染時查找原因。
