亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種

8

聯(lián)系電話

15000017673

您現(xiàn)在的位置: 首頁> 技術(shù)文章 > ELISA試劑盒試驗(yàn)包被過程詳述

ATCC細(xì)胞

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

菌種

生化試劑

培養(yǎng)基

抗體

血清

標(biāo)準(zhǔn)品

PCR檢測試劑盒

ELISA試劑盒

科研抗體

生化檢測試劑盒

科研細(xì)胞

分子生物學(xué)試劑

PCR熒光定量檢測試劑盒

檢測試劑盒

PCR相關(guān)試劑

細(xì)胞培養(yǎng)

公司信息

聯(lián)人:
劉小姐
話:
021-52960952
機(jī):
15000017673
售后電話:
15000017673
真:
021-57690166
址:
上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
編:
200000
網(wǎng)址:
www.bhsy-e.com/
鋪:
http://www.kytsldc.cn/st582730/
給他留言

ELISA試劑盒試驗(yàn)包被過程詳述

2025-4-21  閱讀(21)

  將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與(C?H?)?固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。
 
  1、包被用抗原
 
  用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動(dòng)物組織、微生物培養(yǎng)物等,須經(jīng)提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細(xì)菌和病毒抗原可以從其培養(yǎng)物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中提取等(例如AFP從臍帶血或胎肝中提取)。重組抗原是抗原基因在質(zhì)粒體中表達(dá)的蛋白質(zhì)抗原,多以大腸桿菌或酵母菌為質(zhì)粒體。重組抗原的優(yōu)點(diǎn)是除工程菌成份外,其他雜質(zhì)少,而且無傳染性,但純化技術(shù)難度較大。以大腸桿菌為質(zhì)粒體的重組抗原如不能充分除大腸桿菌成份,用于ELISA,在反應(yīng)中可出現(xiàn)假陽性,因不少受檢者受大腸桿菌感染而在血清中存在抗大腸桿菌抗體。重組抗原的另一特點(diǎn)是能用基因工程制備某些無法從天然材料中分離的抗原物質(zhì)。例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培養(yǎng)成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量極微。目前檢測抗HCV ELISA中所用包被抗原大多為根據(jù)HCV的基因克隆表達(dá)而制備的重組抗原。在傳染病診斷中,不少重組抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在ELISA中取得應(yīng)用。合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一個(gè)抗原決定簇,純度高,特異性也高,但由于分子量太小,往往難于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如牛血清白蛋白質(zhì)(BSA)等偶聯(lián),借助于偶聯(lián)物與固相載體的吸附,間接地結(jié)合到固相載體表面。應(yīng)用多肽抗原的另一注意點(diǎn)為他僅能檢測與其相應(yīng)的抗體。一種蛋白質(zhì)抗原往往含有多個(gè)不同的能引起抗體產(chǎn)生的決定簇,因此在受檢血清中的其他抗體就不能與該多肽抗原發(fā)生反應(yīng)。另外,某些微生物發(fā)生變異時(shí)往往發(fā)生抗原結(jié)構(gòu)變化,在這種情況下,用個(gè)別多肽抗原進(jìn)行包被可引起其他抗體的漏檢。 檢驗(yàn)地帶網(wǎng)
 
  2、包被用抗體
 
  包被固相載體的抗體應(yīng)具有高親和力和高特異性,可取材于抗血清或含單克隆抗體的腹水或培養(yǎng)液。如免疫用抗原中含有雜質(zhì)(即便是極微量的),在抗血清中將出現(xiàn)雜抗體,必須除去(可用吸收法)后才能用于ELISA,以保證試驗(yàn)的特異性。抗血清不能直接用于包被,應(yīng)先提取IgG,通常采用硫酸銨鹽析和Sephadex凝膠過濾法。一般經(jīng)硫酸銨鹽析粗提的IgG已可用于包被,高度純化的IgG性質(zhì)不穩(wěn)定。如需用高親和力的抗體包被以提高試驗(yàn)的敏感性,則可采用親和層析法以除去抗血清中含量較多的非特異性IgG。腹水中單抗的濃度較高,特異性亦較強(qiáng),因此不需要作吸收和親和層析處理,一般可將腹水作適當(dāng)稀釋后直接包被,必要時(shí)也可用純化的IgG。應(yīng)用單抗包被時(shí)應(yīng)注意,一種單抗僅針對(duì)一種抗原決定簇,在某些情況下,用多種單抗混合包被,可取得更好的效果。
 
  3、包被的條件
 
  包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時(shí)間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的 適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
 


產(chǎn)品對(duì)比 二維碼

掃一掃訪問手機(jī)商鋪

對(duì)比框

在線留言
97精品人妻人人做人人爽| 国产又粗又猛又色又免费| 亚洲午夜福利视频在线| 国产欧美一二区不卡视频| 操老女人大逼视频| A级毛片毛片免费观看久| 大鸡巴操大屁股美女视频| 亚洲综合极品香蕉久久网| 精品日本一区二区三区视频播放| 日韩午夜精品中文字幕| 亚洲AV天堂一区二区香蕉| 97人妻精品一区二区三区视频| 99热这里只有精品98| 国产亚洲欧美中文日韩| 被大鸡巴操淫液视频| 黑人巨茎和中国美女视频| 久久高清中文字幕第一页| 青青操成人版性视频| 欧美一级特黄大片在线看| 美女张开腿让男人桶91| 日韩人妻精品一区二区三区| 日本男人捅女人机机| 女人的骚逼免费视频| 国产精品操大屁股老淑女| 三级片手机在线视频| 欧美精品第一区二区三区| 日韩精品无码一区二区三区不卡| 美女骚逼黄色18禁| 尤物性生活午夜在线视频| 鸡巴插进缝里 日本| 视频在线观看一区@99| 国产亂倫近親相姦| 欧美 日韩 国产 自拍| 人人超级碰青青精品| 老头鸡巴操老太骚逼| 99草草视频在线精品| 日本人妻与家公的伦理片| 在线视频观看一区| 人妻熟女av一区二区三区| 亚洲另类激情在线观看| 好想插进去捅一捅|