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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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ATCC細(xì)胞間接法和夾心法
2018-4-18 閱讀(142)
ATCC細(xì)胞間接法和夾心法
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性,顯色清晰者為陽(yáng)性。但在 ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種,大致可分為陽(yáng)性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。
a.陽(yáng)性判定值
陽(yáng)性判定值(cut-off value)一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。
用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定,試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化,陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的?,F(xiàn)舉某種檢測(cè) HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后,先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NC X )和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX;如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍,則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算:
陽(yáng)性判定值=NCX+0.05
標(biāo)本 A值>陽(yáng)性判定值的為陽(yáng)性,小于陽(yáng)性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對(duì)各種試劑均可通用。
根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會(huì)產(chǎn)生"試驗(yàn)無(wú)效"的后果。
ATCC細(xì)胞HPA-v cDNA 人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟cDNA 20 reactions
HPA-s cDNA 人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNA 20 reactions
HMSC-bm cDNA 人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNA 20 reactions
HMSC-ad cDNA 人間充質(zhì)干細(xì)胞(脂肪)cDNA 20 reactions
HMSC-hp cDNA 人間充質(zhì)干細(xì)胞(肝臟)cDNA 20 reactions
HUMSC cDNA 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPMSC cDNA 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞cDNA 20 reactions
HMEpiC cDNA 上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HMF cDNA 成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HUVEC cDNA 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HUAEC cDNA 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HUVSMC cDNA 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HUASMC cDNA 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBMEC tRNA 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA 10 µg
HBVSMC tDNA 人腦血管平滑肌細(xì)胞總RNA 10 µg
HBVC tRNA 人腦血管周細(xì)胞總RNA 10 µg
HCPEC tRNA 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞總RNA 10 µg
HCPEpiC tRNA 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNA 10 µg
HCPF tRNA 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞總RNA 10 µg
HMC tRNA 人腦膜細(xì)胞總RNA 10 µg
HN tRNA 人神經(jīng)元總RNA 10 µg
HCGC tRNA 人小腦顆粒細(xì)胞總RNA 10 µg
HN-h tRNA 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞總RNA 10 µg
HOPC tRNA 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞總RNA 10 µg
HOPC-os tRNA 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長(zhǎng))總RNA 10 µg
HSC tRNA 人雪旺細(xì)胞總RNA 10 µg
HPC tRNA 人神經(jīng)束膜細(xì)胞總RNA 10 µg
HA tRNA 人星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNA 10 µg
HA-c tRNA 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNA 10 µg
HA-sp tRNA 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNA 10 µg
HA-h tRNA 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNA 10 µgATCC細(xì)胞