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細(xì)胞培養(yǎng)中包被液您知道嗎？
2019-4-17 閱讀(7288)
細(xì)胞培養(yǎng)中包被液您知道嗎？
在培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)為了促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁需要對(duì)使用的T-25/T-75等耗材進(jìn)行包被處理，常用的包被液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠，其中ScienCell研究實(shí)驗(yàn)室的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。
其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物，是帶正電荷的氨基酸，通過改變培養(yǎng)基質(zhì)表面的電極來(lái)促進(jìn)細(xì)胞貼壁。在細(xì)胞培養(yǎng)中廣泛用于包被物促進(jìn)細(xì)胞貼壁。除了促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細(xì)胞的存活率和促進(jìn)神經(jīng)突長(zhǎng)出。Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸（PLL，貨號(hào)0403）是原液，分子量是70000～150000。包被液多聚賴氨酸以1-2 ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。可將1mg/ml的包被液多聚賴氨酸以滅菌雙蒸水稀釋100倍，T-75培養(yǎng)瓶中加入10ml左右，37度孵箱1小時(shí)或4度冰箱過夜，用包被液包被好的培養(yǎng)瓶不要放置超過24小時(shí)，包被液可重復(fù)使用2-3次，注意不要污染。
包被液纖維粘連蛋白是分子量為440-500kDa的糖蛋白，存在于細(xì)胞表面蛋白和血漿中。它于細(xì)胞膜表面受體和細(xì)胞外基質(zhì)成分結(jié)合。ScienCell實(shí)驗(yàn)室的包被液牛血漿纖維粘連蛋白（BPF，貨號(hào)8248）使用親和色譜法提純自牛血漿，是促進(jìn)細(xì)胞貼壁和延伸生長(zhǎng)的理想基質(zhì)。包被濃度是2 μg/cm2。如果想達(dá)到j(luò)ia效果取決于細(xì)胞類型。
包被液明膠是來(lái)自于膠原的高分子量水溶蛋白混合物。0.2％的包被液明膠溶液用于包被培養(yǎng)器皿以促進(jìn)細(xì)胞貼壁。用于分化的人胚胎干細(xì)胞，某些原代細(xì)胞和永生化細(xì)胞。
