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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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你知道進(jìn)口elisa試劑盒的檢測(cè)方法嗎？
2020-4-20 閱讀(368)
進(jìn)口elisa試劑盒既可以直接溶解在水里面也可以溶解在溶劑里面.使用很方便，用于防銹油（脂）類產(chǎn)品中，對(duì)銅及其合金，銀及其合金的防腐蝕效果特別明顯，多用于銅及銅合金的氣相緩蝕劑，循環(huán)水處理劑，汽車防凍液，照相防霧劑，高分子穩(wěn)定劑，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，潤(rùn)滑油添加劑等。接下來(lái)，我們來(lái)介紹進(jìn)口elisa試劑盒的兩種檢測(cè)方法及其具體操作流程。
一、進(jìn)口elisa試劑盒的兩種檢測(cè)方法
1、用于檢測(cè)未知抗體的間接法
（1）用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜；
（2）次日洗滌3次；
（3）加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌；
（4）（同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
（5）37℃孵育30-60分鐘，洗滌；
（5）zuihou一遍用DDW洗滌。
二、用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法
（1）包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
（2）加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
（3）加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
（4）加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
（5）終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
（6）結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
