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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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人源細(xì)胞
2020-8-3 閱讀(545)
人源細(xì)胞系的操作流程:
1.貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)特性生長(zhǎng)密度,考慮消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
2.如果人源細(xì)胞系為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)跟進(jìn)解決室技術(shù)人員
3.生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
人源細(xì)胞特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸,建議添加雙抗培養(yǎng))
1.貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒(méi)有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,因?yàn)槁吠绢嶔ぴ斐纱罅匡h忽的情況時(shí),請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)
2.收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))
3.如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并lian系SUER技術(shù)人員