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上海邦景實業(yè)有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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公司信息

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200000
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www.bhsy-e.com/
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http://www.kytsldc.cn/st582730/
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Y2HGold酵母感受態(tài)細胞
Y2HGold酵母感受態(tài)細胞
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具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2022-06-13 14:06:02瀏覽次數:269

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【簡單介紹】
編號 BJ-F0164669
Y2HGold酵母感受態(tài)細胞及公司其它各類產品:兔腎細胞;RK-13
TNFRSF6B Others Human DCR3 / TNFRSF6B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
蚊源細胞 結腸腺癌細胞,SW620[SW-620]細胞 HCC 94 [HCC941122](子宮鱗癌細胞(高分化))
胃腺

生物醫(yī)學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產品。
中文名稱:Y2HGold酵母感受態(tài)細胞
英文名稱:Y2HGold Chemically Competent Cell
產品規(guī)格:10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期:13
產品貨號:BJ-F0164669
產品介紹:

Y2HGold菌株是GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株,MATa型,可直接轉化質?;蚺cMATα型酵母菌株Y187通過mating操作進行蛋白互作驗證或篩庫試驗。

Transformation   marker為:trp1,leu2,報告基因為:AbAr,HIS3ADE2,MEL1。

Y2HGold-GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質粒配套使用:PGBKT7PGADT7。

質粒PGBKT7的篩選標志為TRP1,用于表達DNA-BD(來自酵母轉錄因子GAL4N1~ 174位氨基酸)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白;質粒PGADT7的篩選標志為LEU,用于表達AD(GAL4 C768 ~881位氨基酸)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白。

GAL4系統(tǒng)原理:一個完整的酵母轉錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結構域:位于N1 ~174位氨基酸區(qū)段的DNA結合域(DNA-BD)和位于C768 ~881位氨基酸區(qū)段的轉錄激活域(AD)。

DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并與之結合。

AD可以啟動UAS下游的基因進行轉錄。BDAD單獨存在不能激活轉錄,但當二者接近時,則呈現完整的GAL4活性,使含有UAS的啟動子下游基因轉錄表達。正常條件下,BD不與AD結合,將要檢測的蛋白質分別與BDAD融合,形成bait融合蛋白(bait-BD)prey融合蛋白(prey-AD),如果baitprey發(fā)生相互作用,就會促使BDAD的相互接近,形成完整的GAL4,從而激活報告基因的轉錄。

Y2HGold有四個報告基因:AbAr,HIS3ADE2,MEL1,分別由三種不同的啟動子(G1G2,M1)啟動,這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。此外新報告基因AbAr與以前的營養(yǎng)缺陷報告基因相比具有更低背景的優(yōu)點,也可以降低酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。Y2HGold感受態(tài)細胞經特殊工藝制作,-80℃可保存三個月,經PGADT7質粒檢測轉化效率>104cfu/μg DNA。

保存條件:-80

使用方法:本產品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內,擰緊蓋,在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質填充,并密封,由專人(2)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達,則應盡快在-70以下保存。無-70條件的,需在4冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20-40時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70溫度以下進行。

注意事項:
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
冰凍切片組織鈣ATPPMCA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

石蠟切片組織鈣ATPPMCA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

細胞鈣ATPPMCA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

細胞鈣ATPPMCA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

ATPPMCA蛋白表達西方雜交分析試劑盒
小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa ,英文名: VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit

小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA檢測試劑盒MouseThioredoxin,xELISAKit 96T/48T

人肌直蛋白蛋白(DMPK)免疫試劑盒 Human Myotonin-protein kinase,DMPK ELISA kit

Ratcoagulationfactor,FELISAKit大鼠Ⅲ(F)elisa規(guī)格:96T/48T

10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升

MouseCollagenaseIelisa小鼠膠原酶I(CollagenaseI)elisa規(guī)格:96T/48T
Y2HGold
酵母感受態(tài)細胞小鼠乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)elisa檢測試劑盒

小鼠乳腺癌標志物-CA153elisa分析檢測試劑盒

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa檢測試劑盒

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa分析檢測試劑盒

小鼠乳鐵傳遞蛋白(LTF)elisa檢測試劑盒
操作規(guī)程
1
、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升500010000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2
、.加入適當濃度的010μL 受試化合物。
3
、將96孔板在37,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4
、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5
、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6
、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7
、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8
、結果分析
 a
、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD×100
 b
、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)




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