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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-10-26 09:40:19瀏覽次數(shù)：388
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技術原理：產(chǎn)品僅用于科研
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
弗氏檸檬酸桿菌探針法檢測試劑盒 | Citrobacter freundii | BJ-P9414 |
產(chǎn)品特點:
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復孔間差異小，實驗結(jié)果重復性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)50 次 G 鉀鹽溶液 ,200mg/mL1 Mu
DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次 親和硅烷 25mL
DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)50 次 親和層析柱6 mL
DNA 電泳分子量標準 (2)（50-400 bp）50 次 親和層析柱50 mL
DNA 電泳分子量標準 (2)（300-5000 bp）50 次 親和層析柱30 mL
人白細胞分離液 1.078200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)1個
人中性粒細胞分離液 1.085200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)1個
人粒細胞分離液 1.113200mL 0.5mL DNA 離心超濾管 (150-250 KD)1個
小鼠腫瘤細胞分離液 1.070200mL
小鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.071200mL
大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa檢測試劑盒
大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)elisa檢測試劑盒
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)elisa檢測試劑盒
大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒
倉鼠白介素2(IL-2)elisa檢測試劑盒
倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測試劑盒
倉鼠白介素3(IL-3)elisa檢測試劑盒
弗氏檸檬酸桿菌探針法檢測試劑盒實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
