1：用內參照是為了評價你的各個上樣孔內蛋白的總量是否基本一致，通常使用一些看家蛋白，比如β-actin、GAPDH等等。這些蛋白在所有細胞中的表達量基本一致，所以用他們來作為你加樣量的對照。這樣western結果中你的目的蛋白經過處理后發(fā)生變化，而內參的條帶基本均勻一致。這樣才有說服力，表明的確是處理因素造成目的蛋白的變化而不是加樣誤差或是人為造成目的條帶濃度的變化。嚴格意義上說，內參事必須做的。

2：常用的內參有：b-actin，GAPDH，近2-3 年，更詳細的研究發(fā)現(xiàn)，β-Tubulin (球管蛋白)， 被廣泛應用于Western Blotting，β－Tubolin分子量為55KD左右。

3：一般我們選擇內參與要檢測的目的蛋白的分子量相差5KD以上。因此你要知道你檢測的蛋白的分子量來選擇合適的內參！