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Mouse EGF ELISA Kit

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更新時(shí)間：2018-05-17 10:29:22瀏覽次數(shù)：261次

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產(chǎn)品分類 品牌分類

  ELISA試劑盒

檢測(cè)試劑盒

肝纖試劑盒

TNF-α試劑盒

大鼠ELISA試劑盒

人白介素6試劑盒

人ELISA試劑盒

植物ELISA試劑盒

兔子ELISA試劑盒

豬ELISA試劑盒

細(xì)胞因子試劑盒

小鼠ELISA試劑盒

酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒

腫瘤壞死因子檢測(cè)試劑盒

全部產(chǎn)品列表

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上海聯(lián)邁生物工程有限公司

經(jīng)營(yíng)模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：2964條

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Mouse EGF ELISA Kit
規(guī)格： 96T
檢測(cè)范圍：7.8pg/ml→500pg/ml。
敏感性：＜1pg/ml
特異性：系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月（4℃）；12 個(gè)月（-20℃）。
用途：用于體外定量分析小鼠血清、血漿、尿液、細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清。

詳細(xì)介紹

Mouse EGF ELISA Kit
規(guī)格： 96T
檢測(cè)范圍：7.8pg/ml→500pg/ml。
敏感性：＜1pg/ml
特異性：系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途：用于體外定量分析小鼠血清、血漿、尿液、細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清。
Mouse EGF ELISA Kit工作原理
Epidermal growth factor，（EGF）。和 TGFα，Vaccinia growth factor, amphiregulin 屬于同一家族，
并可結(jié)合至同一 170KDa 的受體。EGF 初合成時(shí)是一個(gè) 1217 個(gè)氨基酸的前體，成熟蛋白質(zhì)僅 53
個(gè)氨基酸，分子量 6.2KDa。EGF 可以促進(jìn)多種細(xì)胞和組織的生長(zhǎng)和分化，如上皮的分化，血管
的再生，間質(zhì)的生長(zhǎng)等。本試劑盒所用標(biāo)準(zhǔn)品為重組小鼠 EGF，54 個(gè)氨基酸，分子量 6.2KDa。
所提供的小鼠 EGF ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（Enzyme
Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。預(yù)先包被的抗體為單克隆抗體。檢測(cè)相抗體為多克隆抗
體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS 或 TBS 洗
滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過 PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB 顯色。
TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣
品中的 EGF 呈正相關(guān)。

內(nèi)容	規(guī)格	數(shù)量
預(yù)包被抗EGF 抗體的 96 孔板	96T	1
凍干標(biāo)準(zhǔn)品	10ng/管	2
生物素標(biāo)記	130ul	1
親和素-過氧化物酶復(fù)合物	130ul	1
樣品稀釋液	30ml	1
抗體稀釋液	12ml	1
ABC 稀釋液	12ml	1
TMB 顯色液	10ml	1
TMB 終止液	10ml	1
洗滌緩沖液(25X)	20ml	1
封板膜		2
說明書		1

需要而未提供的試劑和器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2. 自動(dòng)洗板機(jī)。

3. 恒溫箱

4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，用多通道移液器。

5. 干凈的試管和 Eppendof 管。

6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍，成 1X 洗滌緩沖液。

注意事項(xiàng)

1．使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無色透明溶液，若發(fā)現(xiàn)顏色異常，請(qǐng)及時(shí)與廠家。

2．用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

3 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。

4．為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

5．禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。

6. 本公司提供的 96 孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板，用戶可按需求使用；剩余的酶標(biāo)板請(qǐng)

按保存條件貯存。

7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時(shí)應(yīng)避免用力過大導(dǎo)致液體濺出。

洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi)，浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。

自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

樣品的準(zhǔn)備和保存

樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復(fù)凍融。

細(xì)胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 1500×g 15 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血，抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘，以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

細(xì)胞裂解液——對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打把細(xì)胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后，10000—14000g 離心 3-5 分鐘，取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

樣品稀釋的一般原則

用戶須估計(jì)樣品待測(cè)因子的含量，決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)，以使稀釋后樣品中待測(cè)因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測(cè)范圍。根據(jù)待測(cè)因子含量高、中、低的不同，分別采取不同的

稀釋方案：

高——指待測(cè)因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。

中——指待測(cè)因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。

低——指待測(cè)因子在 31.2-2000pg/ml。按 1：2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。

特低——指待測(cè)因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋，或按 1：2 稀釋。

操作程序總結(jié)：

1．加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。

2．加生物素標(biāo)記抗體，37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。

3．加 ABC，37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。

4． TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。