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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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| 參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間：2018-05-18 09:48:57瀏覽次數(shù)：263次
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Mouse RAGE ELISA Kit
規(guī)格： 96T
檢測范圍： 78pg/ml→5,000pg/ml
敏感性： ＜2pg/ml
特異性： 系統(tǒng)和其它因子無交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月（4℃）；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析小鼠血清、血漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清。
Mouse RAGE ELISA Kit
規(guī)格： 96T
檢測范圍： 78pg/ml→5,000pg/ml
敏感性： ＜2pg/ml
特異性： 系統(tǒng)和其它因子無交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析小鼠血清、血漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清。
Mouse RAGE ELISA Kit工作原理
糖基化終產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)是一種膜蛋白，屬于免疫球
蛋白超家族。它與免疫球蛋白超家族中的 MUC18 糖蛋白、神經(jīng)細胞粘附分子(nerve cell adhesion
molecule,NCAM)及 CD20 胞內(nèi)部分的氨基酸序列高度同源。可溶性 RAGE(soluble RAGE,sRAGE)
即 RAGE 胞外段，為配體結(jié)合部位，具有 V 型片段緊接兩個 C 型片段的免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)，每
個都含有一對保守的半胱氨酸殘基，V型片段還含有兩個與N偶聯(lián)的糖基化位點，這些對于RAGE
分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和特異識別配體的功能具有重要意義。
所提供的小鼠 RAGE ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（EnzymeLinked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。預先包被的抗體和檢測相抗體都是多克隆抗體。檢測相抗體經(jīng)生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后，PBS 或 TBS 洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過 PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠 RAGE 呈正相關(guān)。
內(nèi)容 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
預包被抗RAGE 抗體的 96 孔板 | 96T | 1 |
凍干標準品 | 10ng/管 | 2 |
生物素標記 | 130ul | 1 |
親和素-過氧化物酶復合物 | 130ul | 1 |
樣品稀釋液 | 30ml | 1 |
抗體稀釋液 | 12ml | 1 |
ABC 稀釋液 | 12ml | 1 |
TMB 顯色液 | 10ml | 1 |
TMB 終止液 | 10ml | 1 |
洗滌緩沖液(25X) | 20ml | 1 |
封板膜 |
| 2 |
說明書 |
| 1 |
需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 恒溫箱
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍，成 1X 洗滌緩沖液。
注意事項
1． 使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無色透明溶液，若發(fā)現(xiàn)顏色異常，請及時與廠家。
2． 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
3 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活。
4． 為免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和試管。
5． 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
6. 本公司提供的 96 孔酶標板是單條可拆型酶標板，用戶可按需求使用；剩余的酶標板請
按保存條件貯存。
7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時應(yīng)避免用力過大導致液體濺出。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi)，浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
樣品的準備和保存
樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復凍融。
細胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 1500×g 15 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血，抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘，以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細胞裂解液——對于貼壁細胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后，細胞就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打把細胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后，10000—14000g 離心 3-5 分鐘，取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
樣品稀釋的一般原則
用戶須估計樣品待測因子的含量，決定適當?shù)南♂尡稊?shù)，以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測范圍。根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同，分別采取不同的
稀釋方案：
高——指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。
中——指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。
低——指待測因子在 31.2-2000pg/ml。按 1：2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。
特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋，或按 1：2 稀釋。
操作程序總結(jié)：
1． 加樣品和標準品，37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。
2． 加生物素標記抗體，37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。
3． 加 ABC，37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。
4． TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。
5． 加入 TMB 終止液，讀數(shù)。
山羊 羥脯氨酸 Hyp hydroxyproline
山羊 乳酸脫氫酶 LDH Lactate Dehydrogenase
山羊 乳鐵蛋白 LTF Lactoferrin
山羊 生長激素 GH growth hormone
山羊 褪黑素 MT Melatonin
山羊 維生素K1 VK1 Vitamin K1
山羊 纖溶酶原激活物抑制因子1 PAI-1 plasminogen activator inhibitor 1
山羊 雄激素 androgen androgen
山羊 血漿α顆粒膜蛋白 GMP-140 alpha-granular membrane protein
山羊 胰島素 INS Insulin
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