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MEG-01人成巨核細胞白血病細胞(STR鑒定)

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更新時間:2018-05-24 08:43:59瀏覽次數:586次

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產品簡介

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞(STR鑒定)MEG-01細胞株源自一位CML患者成巨核細胞轉換期的骨髓細胞。細胞質因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反應,α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性。髓過氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。 用單克隆抗體BA-
英文名稱:Human Megakaryocytic Leukemia Cells

詳細介紹

MEG-01人成巨核細胞白血病細胞(STR鑒定)
英文名稱:Human Megakaryocytic Leukemia Cells
規(guī)格:1*10 6  
細胞介紹
MEG-01細胞株源自一位CML患者成巨核細胞轉換期的骨髓細胞。細胞質因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反應,α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性。髓過氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。 用單克隆抗體BA-1(抗B細胞,粒性白細胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細胞,血小板)染色成陽性。 其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
一、細胞特性
1) 來源:巨核細胞母細胞;慢性骨髓性白血病(CML)
2) 形態(tài):淋巴母細胞
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
MEG-01人成巨核細胞白血病細胞(STR鑒定)
在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
三、細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集,1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心5分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);

  1. 凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發(fā);
  2. 存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發(fā);
  3. 凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發(fā);
  4. 視具體情況而定。

 ★ 注:如運輸過程中導致細胞污染或者死亡,我們將無條件補發(fā) 收貨后十個工作日內有其他問題提供照片可半價重發(fā)。

相關細胞系列表:

鼠/人雜交瘤細胞系;HybridLivercellGLH03 人源 1×10^6 細胞數/ml

小鼠雜交瘤細胞;HB9.4 小鼠源 1×10^6 細胞數/ml

鼠/人雜交瘤細胞系;HybridLivercellGLH04 人源 1×10^6 細胞數/ml

小鼠雜交瘤細胞;HBG17-2 小鼠源 1×10^6 細胞數/ml

鼠/人雜交瘤細胞系;HybridLivercellGLH02 人源 1×10^6 細胞數/ml

小鼠雜交瘤細胞;HBG3-5 小鼠源 1×10^6 細胞數/ml

小鼠雜交瘤細胞;HBNI8 小鼠源 1×10^6 細胞數/ml

小鼠雜交瘤細胞;HBPE9 小鼠源 1×10^6 細胞數/ml


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