細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)Tunel檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時(shí)間:2018-06-08 13:16:27瀏覽次數(shù):180次
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植物RNAout本產(chǎn)品是LMAI Bio自主開發(fā)的*產(chǎn)品,其原理*不同于異硫氰酸胍/酚/提取方法,克服了后者不能區(qū)分RNA(本質(zhì)上是多糖)和其它植物多糖的缺點(diǎn),能高效將RNA和其它植物多糖分開,同時(shí)還能有效去除多酚和其它植物次級(jí)代謝成份。其有效性在近五十多種各類植物(見附錄,包括十分棘手的松柏類植物)中得到驗(yàn)證。本產(chǎn)品還可以用于富含粘性糖蛋白的動(dòng)物組織。
1. 適用于絕大多數(shù)植物,從五十多
植物RNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
植物RNAout | 50次 | 790元 |
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本產(chǎn)品是LMAI Bio自主開發(fā)的*產(chǎn)品,其原理*不同于異硫氰酸胍/酚/提取方法,克服了后者不能區(qū)分RNA(本質(zhì)上是多糖)和其它植物多糖的缺點(diǎn),能高效將RNA和其它植物多糖分開,同時(shí)還能有效去除多酚和其它植物次級(jí)代謝成份。其有效性在近五十多種各類植物(見附錄,包括十分棘手的松柏類植物)中得到驗(yàn)證。本產(chǎn)品還可以用于富含粘性糖蛋白的動(dòng)物組織。
1. 適用于絕大多數(shù)植物,從五十多種植物材料中都成功提取到了總RNA,其中包括松針,柏樹,香蕉等用胍/酚/方法未能提取到RNA的植物(注:部分植物組織,如果實(shí),含RNase量*,需要另外加RVC抑制其活性)。
2. 操作簡(jiǎn)單快速,zui短可以只需要約十五分鐘,可以全在室溫下進(jìn)行。
3. 得到的RNA平均 OD260/280在1.9左右,可直接用于RT-PCR等研究。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
氧釩核糖核苷復(fù)合物(RVC ),0.2M
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