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所 在 地上海市
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更新時(shí)間：2018-06-11 20:48:42瀏覽次數(shù)：297次
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柱式血液DNA-RNAout本產(chǎn)品是北京LMAI Bio在柱式血液RNAout（CAT#：71202）基礎(chǔ)上開發(fā)的升級(jí)產(chǎn)品，采用先裂解紅細(xì)胞后純化白細(xì)胞，再?gòu)闹蟹謩e提取總RNA和DNA的策略。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 本產(chǎn)品可用于血液RNA提取、血液DNA提取以及DNA和RNA雙提，充分 利用寶貴的血液樣品。
柱式血液DNA-RNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
柱式血液DNA-RNAout | 50支 | 詢價(jià) |
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本產(chǎn)品是北京LMAI Bio在柱式血液RNAout（CAT#：71202）基礎(chǔ)上開發(fā)的升級(jí)產(chǎn)品，采用先裂解紅細(xì)胞后純化白細(xì)胞，再?gòu)闹蟹謩e提取總RNA和DNA的策略。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 本產(chǎn)品可用于血液RNA提取、血液DNA提取以及DNA和RNA雙提，充分 利用寶貴的血液樣品。
2. 無(wú)需使用有毒的酚和氯，綠色環(huán)保。
3. 采取先裂解紅細(xì)胞的兩步法，避免了血紅素等對(duì)RNA和DNA的污染。
3. RNA直接從白細(xì)胞胞漿中提取，*避免了細(xì)胞核基因組DNA的污染。
4. 純度高，RNA的OD260/280均在2.0左右，DNA的OD260/280均在 1.8-1.9左右。
5. 產(chǎn)率高，新鮮血液樣品RNA產(chǎn)率一般為5-50 ug/mL，DNA的產(chǎn)率一般在 5-8 ug/mL。對(duì)凍存血，RNA和DNA產(chǎn)率跟凍存時(shí)間密切相關(guān)，波動(dòng)極大。
6. 與常用的抗凝劑(包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉)兼容。
7. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern雜交等研究。所得的DNA 可直接用于PCR、酶切等實(shí)驗(yàn)。
8. 如果需要提取細(xì)胞核中的RNA前體，或者提取胞漿中線粒體DNA，則不能 使用本方法。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Sodium Borate Buffer（硼酸鈉緩沖液）,0.5M,pH8.5
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Sodium Carbonate Bicarbonate,0.5M,pH9.0
Sodium Carbonate Solution（碳酸鈉溶液）,0.5M,pH10
Sodium Carbonate Solution（碳酸鈉溶液）,0.5M,pH9.4
Sodium Chloride Solution（化鈉溶液），0.9%
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