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石蠟包埋組織DNAout

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更新時(shí)間:2018-06-11 20:49:14瀏覽次數(shù):267次

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產(chǎn)品簡介

石蠟包埋組織DNAout石蠟包埋組織本是珍貴的分子生物學(xué)研究材料,但是由于它們的保存時(shí)間一般都比較長,很不容易從中提取到高質(zhì)量的DNA,存在的主要問題是DNA的斷裂和脫蠟過程中樣品的丟失。產(chǎn)品是專門用于從甲醛和非甲醛固定的石蠟包埋組織中快提基因組DNA的試劑,具有下列特點(diǎn):
1. 一管式操作,避免了可能的交叉污染。
2. 含一步離心式脫蠟試劑,不需要使用有毒的二甲苯,健康環(huán)保。

詳細(xì)介紹

 

石蠟包埋組織DNAout

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規(guī)格

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手冊(cè)

石蠟包埋組織DNAout

30次

990元

 

石蠟包埋組織本是珍貴的分子生物學(xué)研究材料,但是由于它們的保存時(shí)間一般都比較長,很不容易從中提取到高質(zhì)量的DNA,存在的主要問題是DNA的斷裂和脫蠟過程中樣品的丟失。產(chǎn)品是專門用于從甲醛和非甲醛固定的石蠟包埋組織中快提基因組DNA的試劑,具有下列特點(diǎn):
1. 一管式操作,避免了可能的交叉污染。
2. 含一步離心式脫蠟試劑,不需要使用有毒的二甲苯,健康環(huán)保。
3. 得到的提取物可以直接用于PCR反應(yīng)。
4. 得到的DNA的OD260/280一般在1.6左右,長度在0.4-25 Kb之間,可以直接作為PCR模板。
5. 即開即用,客戶自己不需要準(zhǔn)備額外的試劑。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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