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更新時間：2018-06-11 21:18:03瀏覽次數(shù)：140次
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分枝桿菌DNAout分枝桿菌屬（Mycobacterium）是極為重要的一類致病菌，與人類的疾病相關(guān)的就有25種以上，包括引起結(jié)核病的結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis）。近年來由于多重耐藥性分枝桿菌的出現(xiàn)，結(jié)核病發(fā)病率的上升，分枝桿菌再次引起人們的重視。由于培養(yǎng)的分枝桿菌生長極其緩慢（一個細(xì)菌長成菌落需要數(shù)周），所以PCR是目前快速檢測分枝桿菌的主要方法，但由于其十分*的堅硬的細(xì)胞壁，
分枝桿菌DNAout
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分枝桿菌DNAout | 50次 | 詢價 |
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分枝桿菌屬（Mycobacterium）是極為重要的一類致病菌，與人類的疾病相關(guān)的就有25種以上，包括引起結(jié)核病的結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)。近年來由于多重耐藥性分枝桿菌的出現(xiàn)，結(jié)核病發(fā)病率的上升，分枝桿菌再次引起人們的重視。由于培養(yǎng)的分枝桿菌生長極其緩慢(一個細(xì)菌長成菌落需要數(shù)周)，所以PCR是目前快速檢測分枝桿菌的主要方法，但由于其十分*的堅硬的細(xì)胞壁，快速提取作為PCR模板用的分枝桿菌基因組DNA一直是十分棘手的技術(shù)問題。本產(chǎn)品就是LMAI Bio為解決這一問題而專門開發(fā)的產(chǎn)品，具有下列特點：
1. *的一步式裂解分枝桿菌方法，整個提取過程只需要30多分鐘。
2. 得到DNA的OD260/280一般在1.7-2.0之間，產(chǎn)量一般在2-5 μg/mg菌體。可用于各種后續(xù)實驗，用于PCR時的檢測靈敏度為10-100 CFU/mL液體樣品。
3. 既可以使用培養(yǎng)的細(xì)菌，也可以使用痰液、血液、腦脊液等液體樣品，還可以使用動物和人體的組織樣品。
4. 適用于各種分枝桿菌，包括M. tuberculosis、M. avium、M. ulcerans。
5. 價廉物美，與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng)，但價格便宜。價廉物美，性價比遠(yuǎn)高于國外同類產(chǎn)品。
6. 適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Glucose Veronal Buffer (GVB)
Glucose Veronal Buffer with EDTA(GVBE)
Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)
Glucose-Gelatin Veronal Buffer with EDTA (GGVBE)
Glycerol Solution（甘油溶液），20%
Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5
Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0
Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH6.5
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