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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間：2018-06-11 21:18:03瀏覽次數(shù)：147次
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分枝桿菌DNAout分枝桿菌屬（Mycobacterium）是極為重要的一類致病菌，與人類的疾病相關的就有25種以上，包括引起結核病的結核分枝桿菌（M.tuberculosis）。近年來由于多重耐藥性分枝桿菌的出現(xiàn)，結核病發(fā)病率的上升，分枝桿菌再次引起人們的重視。由于培養(yǎng)的分枝桿菌生長極其緩慢（一個細菌長成菌落需要數(shù)周），所以PCR是目前快速檢測分枝桿菌的主要方法，但由于其十分*的堅硬的細胞壁，
分枝桿菌DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
分枝桿菌DNAout | 50次 | 詢價 |
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分枝桿菌屬（Mycobacterium）是極為重要的一類致病菌，與人類的疾病相關的就有25種以上，包括引起結核病的結核分枝桿菌(M.tuberculosis)。近年來由于多重耐藥性分枝桿菌的出現(xiàn)，結核病發(fā)病率的上升，分枝桿菌再次引起人們的重視。由于培養(yǎng)的分枝桿菌生長極其緩慢(一個細菌長成菌落需要數(shù)周)，所以PCR是目前快速檢測分枝桿菌的主要方法，但由于其十分*的堅硬的細胞壁，快速提取作為PCR模板用的分枝桿菌基因組DNA一直是十分棘手的技術問題。本產品就是LMAI Bio為解決這一問題而專門開發(fā)的產品，具有下列特點：
1. *的一步式裂解分枝桿菌方法，整個提取過程只需要30多分鐘。
2. 得到DNA的OD260/280一般在1.7-2.0之間，產量一般在2-5 μg/mg菌體。可用于各種后續(xù)實驗，用于PCR時的檢測靈敏度為10-100 CFU/mL液體樣品。
3. 既可以使用培養(yǎng)的細菌，也可以使用痰液、血液、腦脊液等液體樣品，還可以使用動物和人體的組織樣品。
4. 適用于各種分枝桿菌，包括M. tuberculosis、M. avium、M. ulcerans。
5. 價廉物美，與國外同類產品相比質量相當，但價格便宜。價廉物美，性價比遠高于國外同類產品。
6. 適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細胞上清液等無細胞材料。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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