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柱式分枝桿菌DNAout

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

柱式分枝桿菌DNAout本產(chǎn)品是LMAI Bio在分枝桿菌DNAOUT(CAT#:70702)基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,具有下列特點(diǎn):
1. 操作比分枝桿菌DNAOUT更加簡(jiǎn)單,整個(gè)提取過(guò)程只需要10-20分鐘。

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柱式分枝桿菌DNAout

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柱式分枝桿菌DNAout

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本產(chǎn)品是LMAI Bio在分枝桿菌DNAOUT(CAT#:70702)基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,具有下列特點(diǎn):
1. 操作比分枝桿菌DNAOUT更加簡(jiǎn)單,整個(gè)提取過(guò)程只需要10-20分鐘。
2. 得到DNA的OD260/280一般在1.7-2.0之間,產(chǎn)量一般在2-5 μg/mg菌體??捎糜诟鞣N后續(xù)實(shí)驗(yàn),用于PCR時(shí)的檢測(cè)靈敏度為10-100 CFU/mL液體樣品。
3. 既可以使用培養(yǎng)的細(xì)菌,也可以使用痰液、血液、腦脊液等液體樣品,還可以使用動(dòng)物和人體的組織樣品。
4. 適用于各種分枝桿菌,包括M. tuberculosis、M. avium、M. ulcerans。
5. 價(jià)廉物美,與國(guó)外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格便宜。價(jià)廉物美,性價(jià)比遠(yuǎn)低于國(guó)外同類產(chǎn)品。
6. 適用于各種材料,包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無(wú)細(xì)胞材料。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無(wú)色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
Gelatin Veronal Buffer (GVB)  
Gelatin Veronal Buffer with EDTA (GVBE)  
Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and Ca++ (GVB++)  
Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)  
Gelatin-Tween in PBS  
Gelatin-Tween in TBS 
Glucose Solution(葡萄糖溶液),1M 
Glucose Solution(葡萄糖溶液),20%(W/V)


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