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更新時(shí)間：2018-06-11 21:06:05瀏覽次數(shù)：264次
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柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout本產(chǎn)品是整合LMAI Bio柱式質(zhì)粒DNAOUT和菌體內(nèi)毒素清除劑兩產(chǎn)品而成。菌體內(nèi)毒素清除劑是LMAI Bio*推出的產(chǎn)品，在質(zhì)粒提取前就把細(xì)胞壁上的內(nèi)毒素清除掉，*避免了目前通用的先提取DNA+內(nèi)毒素混合物，再從中純化質(zhì)粒DNA的弊端。用本產(chǎn)品提取的質(zhì)粒DNA，內(nèi)毒素的污染濃度低，適合于轉(zhuǎn)染等對(duì)內(nèi)毒素的污染敏感的實(shí)驗(yàn)。
1. 操作簡單，只在經(jīng)典的柱式質(zhì)粒DNA提
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNAout | 50次 | 390元 |
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本產(chǎn)品是整合LMAI Bio柱式質(zhì)粒DNAOUT和菌體內(nèi)毒素清除劑兩產(chǎn)品而成。菌體內(nèi)毒素清除劑是LMAI Bio*推出的產(chǎn)品，在質(zhì)粒提取前就把細(xì)胞壁上的內(nèi)毒素清除掉，*避免了目前通用的先提取DNA+內(nèi)毒素混合物，再從中純化質(zhì)粒DNA的弊端。用本產(chǎn)品提取的質(zhì)粒DNA，內(nèi)毒素的污染濃度低，適合于轉(zhuǎn)染等對(duì)內(nèi)毒素的污染敏感的實(shí)驗(yàn)。
1. 操作簡單，只在經(jīng)典的柱式質(zhì)粒DNA提取前，增加菌體內(nèi)毒素清除一步。
2. 去內(nèi)毒素效果好，處理一次可以去除99%以上的內(nèi)毒素。
3. 質(zhì)粒丟失少，產(chǎn)率只比柱式質(zhì)粒DNAOUT低5-10%，效果好于先提質(zhì)粒DNA，再用液相內(nèi)毒素清除劑處理的方法。
4. DNA可以直接用于轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Beta Glycerophosphate Solution（beta-磷酸甘油溶液）,100mM
Beta-ME-EDTA Solution（beta-巰基乙醇-EDTA溶液）
Bicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液），1M,pH8.5
Bicarbonate Buffer（碳酸氫鹽緩沖液）,1M,pH9.0
Bicine Buffer，0.5M,pH7.4
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Bicine Buffer，0.5M,pH8.5
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Biotin Solution（生物素溶液）,0.02%
Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0
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