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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間：2018-06-12 15:40:52瀏覽次數(shù)：136次
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柱式探針純化試劑盒本產(chǎn)品是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標(biāo)記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中，大分子（標(biāo)記的核酸探針或Oligo探針）將繞過層析介質(zhì)，快速穿透出層析柱，小分子（未參入的核苷酸）將進入層析介質(zhì)中，緩慢穿透出層析柱。根據(jù)這一時間差而將兩者分開。本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質(zhì)，不需要單獨準(zhǔn)備每種試劑，免去用戶自己摸索條
柱式探針純化試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
柱式探針純化試劑盒 | 10次 | 990元 |
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本產(chǎn)品是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標(biāo)記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中，大分子（標(biāo)記的核酸探針或Oligo探針）將繞過層析介質(zhì)，快速穿透出層析柱，小分子（未參入的核苷酸）將進入層析介質(zhì)中，緩慢穿透出層析柱。根據(jù)這一時間差而將兩者分開。本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質(zhì)，不需要單獨準(zhǔn)備每種試劑，免去用戶自己摸索條件。
2. 適用于PCR標(biāo)記、隨機引物標(biāo)記、切口平移和填入法標(biāo)記。
3. 能去掉絕大部分的未標(biāo)記物、鹽離子等小分子。
4. 足夠10次純化使用，每次可以純化50 uL的標(biāo)記反應(yīng)液。
5. 可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素標(biāo)記的DNA和RNA探針。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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