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即用型長片段PCR試劑盒

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即用型長片段PCR試劑盒一般PCR法具有一定的局限性，特別是難以擴(kuò)增5 Kb以上的長鏈DNA，這嚴(yán)重限制了PCR法的推廣和應(yīng)用。本產(chǎn)品通過改變PCR用DNA聚合酶、PCR用Buffer、PCR擴(kuò)增條件等，使長鏈DNA的擴(kuò)增成為可能。本產(chǎn)品可以很穩(wěn)定的擴(kuò)增出終長度小于15 Kb的片段。
1. 方便，試劑盒內(nèi)含有Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR增強(qiáng)

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即用型長片段PCR試劑盒

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即用型長片段PCR試劑盒	20次	詢價(jià)

一般PCR法具有一定的局限性，特別是難以擴(kuò)增5 Kb以上的長鏈DNA，這嚴(yán)重限制了PCR法的推廣和應(yīng)用。本產(chǎn)品通過改變PCR用DNA聚合酶、PCR用Buffer、PCR擴(kuò)增條件等，使長鏈DNA的擴(kuò)增成為可能。本產(chǎn)品可以很穩(wěn)定的擴(kuò)增出終長度小于15 Kb的片段。

1. 方便，試劑盒內(nèi)含有Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR所需要的成分，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行長片段PCR實(shí)驗(yàn)。

2. 快捷，操作步驟已經(jīng)大限度地簡(jiǎn)化，能減少污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。

3. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。

4. 本產(chǎn)品A型含電泳染料，PCR反應(yīng)液可直接上樣電泳，進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。

5. 本制品中還配備了LA PCR 增效劑供用戶選擇使用，可以對(duì)擴(kuò)增GC rich的DNA片段、DNA重復(fù)序列、具有復(fù)雜立體結(jié)構(gòu)的DNA片段等發(fā)揮強(qiáng)大威力。

6. 成分中的穩(wěn)定劑也使試劑更穩(wěn)定。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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