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即用型熒光定量PCR試劑盒

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更新時間：2018-06-13 14:28:09瀏覽次數(shù)：248次

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產(chǎn)品簡介

即用型熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測的即用型PCR試劑盒，可以對靶片段進行實時定量PCR分析（quantitative PCR、qPCR）。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有實時定量PCR所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行實時定量PCR反應(yīng)和HRM分析，具有廣泛的用途。

詳細介紹

即用型熒光定量PCR試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
即用型熒光定量PCR試劑盒	1mL	230元

本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測的即用型PCR試劑盒，可以對靶片段進行實時定量PCR分析（quantitative PCR、qPCR）。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有實時定量PCR所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行實時定量PCR反應(yīng)和HRM分析，具有廣泛的用途。

1. 方便，用戶只需準備模板和引物既可以進行實時定量PCR實驗和HRM（High Resolution DNA Melt Curve Analysis）分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix則不能同時用于上述兩種實驗。

2. 使用第三代飽和型熒光染料，信號強，不會抑制PCR反應(yīng)。

3. 快捷，即用型的預(yù)配液使加樣操作步驟大大簡化，避免了交叉污染，降低實驗誤差。

4. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強。能檢測到濃度為50拷貝/mL的靶分子。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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