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自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（lac啟動(dòng)子）

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（lac啟動(dòng)子）本產(chǎn)品是在pET生長(zhǎng)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)而成的，它利用E.coli自身對(duì)培養(yǎng)基中碳源和能源的調(diào)控利用機(jī)制，實(shí)現(xiàn)外源蛋白在細(xì)菌達(dá)到飽和期后的自動(dòng)誘發(fā)。具有下列特點(diǎn)：
1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導(dǎo)物，節(jié)約成本。
2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過(guò)程，尤其適合大規(guī)模篩選。

詳細(xì)介紹

自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（lac啟動(dòng)子）

名稱	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（lac啟動(dòng)子）	200mL	690元

本產(chǎn)品是在pET生長(zhǎng)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)而成的，它利用E.coli自身對(duì)培養(yǎng)基中碳源和能源的調(diào)控利用機(jī)制，實(shí)現(xiàn)外源蛋白在細(xì)菌達(dá)到飽和期后的自動(dòng)誘發(fā)。具有下列特點(diǎn)：

1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導(dǎo)物，節(jié)約成本。

2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過(guò)程，尤其適合大規(guī)模篩選。

3. 細(xì)菌生長(zhǎng)密度遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng) 。

4. 外源蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)。

5. 本產(chǎn)品即開(kāi)即用，操作簡(jiǎn)單。

6. 與各種細(xì)胞培養(yǎng)容器兼容（如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)罐、深孔管、發(fā)酵罐等）。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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