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超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測試劑盒本產(chǎn)品用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western)或核酸印跡實(shí)驗(yàn)(Southern或Northern)中辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體的超靈敏檢測。該產(chǎn)品基于新一代增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光(ECL)底物研制而成,在HRP的催化下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而發(fā)光,可用于檢測固定在印跡膜上的蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子。本產(chǎn)品具備以下特點(diǎn):
超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊 |
超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測試劑盒 | 250mL | 詢價(jià) |
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本產(chǎn)品用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western)或核酸印跡實(shí)驗(yàn)(Southern或Northern)中辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體的超靈敏檢測。該產(chǎn)品基于新一代增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光(ECL)底物研制而成,在HRP的催化下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而發(fā)光,可用于檢測固定在印跡膜上的蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子。本產(chǎn)品具備以下特點(diǎn):
1. 即開即用,非常方便。
2. 高靈敏度,能夠檢測pg級別的抗原。
3. 改良配方,發(fā)光信號(hào)強(qiáng)烈持久。
4. 可以使用照相技術(shù)(X-光膠片曝光)或者其他成像方法(如熒光或化學(xué)發(fā)光成像儀)進(jìn)行檢測。
6. 可用于Western、Southern、Northern等印跡雜交檢測。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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