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閱讀:592發(fā)布時間:2019-5-27
當(dāng)即測驗其吸光度值,等過幾分鐘再測驗吸光度值,發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第2次均小于*次。近日的李老師在操作ELISA試劑盒實驗的時分發(fā)現(xiàn)了一個問題,于是來電我公司的售后部分問道:加完顯色液(購買)顯色一定時刻后,再加停止液(2M H2SO4,自己制造)后,而且,加停止液時,從*條加到第12條后,測驗發(fā)現(xiàn),吸光度值從1-12條逐級衰減。條件是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,而且包被相同蛋白。
通過我公司技術(shù)專員的剖析,本來ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應(yīng)對。
其實具體的原因也很簡單,有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下,停止反響后OD值的下降前期不是很明顯。停止后,吸光度值是會跟著時刻衰減,所以一般是加完停止液后當(dāng)即測,這樣比較準(zhǔn)。再次剖析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:
① 顯色時刻調(diào)整,如果你現(xiàn)在的顯色時刻是10MIN,那調(diào)整到30MIN,再加停止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒,顯色時刻是30分鐘,停止后要求在30分鐘內(nèi)檢測,加入停止液后,在加入停止液后2到3分終內(nèi)檢測,這是OD值相對比較高。擬合值能到達(dá)四個9。
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