ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，其基本原理是將必定濃度的抗原或許抗體經(jīng)過物理吸附的辦法固定于聚苯乙烯微孔板外表，參加待檢標(biāo)本，ELISA試劑盒經(jīng)過酶標(biāo)物顯色的深淺直接反映被檢抗原或許抗體的存在與否或許量的多少。具有快速，定性或許定量乃至定位的特點(diǎn)。
1.雙抗體夾心法
雙抗體夾心法，其基本原理是將必定量的包被抗體以物理吸附的辦法固定于聚苯乙烯微孔板外表，參加無關(guān)蛋白載體關(guān)閉未結(jié)合位點(diǎn)，然后參加待檢標(biāo)本，經(jīng)過參加檢測(cè)抗體，酶符號(hào)第二抗體后用TMB底物顯色，微孔板中顏色的深淺與待測(cè)物的濃度呈正相關(guān)。
該辦法的適用條件是：含有多個(gè)抗原表位的大分子物質(zhì)。由于這種檢測(cè)辦法需求兩種抗體，所以就涉及抗體配對(duì)的問題。一般來說，ELISA試劑盒常用的抗體配對(duì)辦法有一下幾種：包被抗體為單抗，檢測(cè)抗體為多抗；包被抗體為單抗，檢測(cè)抗體為單抗，但這兩種單抗針對(duì)的抗原表位不同；包被抗體為多抗，檢測(cè)抗體為多抗，這兩種多抗一般是來源于不同的宿主。
2.雙抗原夾心法
雙抗原夾心法，與雙抗體夾心法相似，基本原理是將已知濃度的抗原固定于聚苯乙烯微孔板外表，對(duì)未結(jié)合位點(diǎn)用無關(guān)蛋白載體進(jìn)行關(guān)閉后，參加待檢樣本，然后參加*符號(hào)的抗原和HRP符號(hào)的鏈霉親和素，經(jīng)TMB顯色和停止反響，酶標(biāo)儀讀數(shù)之后即可計(jì)算待測(cè)物濃度。雙抗原夾心法與直接法都能夠?qū)贵w進(jìn)行檢測(cè)，可是前者檢測(cè)的是針對(duì)該抗原的所有品種的抗體。
3.競賽法
競賽法一般分為直接競賽法和直接競賽法，這里我們以直接競賽法為例進(jìn)行原理解說。直接競賽法，其基本原理是：將適宜濃度的包被抗體包被于微孔板中，ELISA試劑盒參加無關(guān)蛋白載體關(guān)閉未結(jié)合位點(diǎn)，參加規(guī)范品（樣本）和*符號(hào)的抗原物質(zhì)進(jìn)行競賽結(jié)合，經(jīng)適宜的溫度和必定時(shí)間的孵育，洗刷后，參加HRP符號(hào)的鏈霉親和素進(jìn)行反響，TMB顯色，微孔板中顏色的深淺與待測(cè)物的濃度呈負(fù)相關(guān)。
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