血清是常用的標(biāo)本，血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽性和假陰性成果主要是攪擾性物質(zhì)所致，ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：
內(nèi)源性物質(zhì)
普遍認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性攪擾物質(zhì)，能夠不同程度影響檢測成果。常見的攪擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s）抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
（1）類風(fēng)濕因子
人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）能夠與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致假陽性。處理該狀況的方法是：①用F（ab）2替代完好的IgG；②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG參加到標(biāo)本稀釋液中相同有效）；③檢測抗原時，能夠用2-巰基乙醇等參加到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。
（2）補(bǔ)體
ELISA體系中固相一抗和符號二抗過程中，ELISA試劑盒抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點被暴露出來，使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來，然后造成假陽性。處理的方法是：①用EDTA稀釋標(biāo)本；②用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。
（3）嗜異性抗體
人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig （s） 結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來，也能造成假陽性。處理的方法是：可在標(biāo)本稀釋液中參加過量的動物Ig （s） ，但參加量缺乏或亞類不一起無效。
（4）嗜靶抗原的本身抗體
抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體，ELISA試劑盒有時能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在ELISA方法中均可攪擾抗原抗體測定成果。為防止以上狀況呈現(xiàn)，處理的方法是：測定前需用理化方法將其解離后再測定。
（5）標(biāo)本凝聚不全
在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液收集后1/2~2h開始凝結(jié)，18~24h*凝結(jié)。臨床查驗工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝結(jié)時即強(qiáng)行離心別離血清，此刻的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA試劑盒測定過程中能夠形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性成果；這類狀況于次日復(fù)查時因血凝已*，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查成果變?yōu)殛幮?。為防止上述攪擾作用，處理的方法是血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清，或標(biāo)本收集時用帶別離膠的*或于*中參加適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />
（6）人ELISA試劑盒標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過氧化物酶活性）及快速別離血清的別離膠等均對ELISA測定有一定攪擾作用。
經(jīng)過以上的分析和總結(jié)，查驗ELISA測定中呈現(xiàn)假陽性或假陰性等錯誤的成果，掃除ELISA試劑盒因素和操作因素，再有便是從標(biāo)本因素進(jìn)行分析，并應(yīng)采取相應(yīng)措施掃除攪擾，然后保證檢測成果的準(zhǔn)確性。
